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kehan777木蟲 (小有名氣)
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[求助]
轉(zhuǎn)化后涂布,陰性對(duì)照培養(yǎng)皿上長有一兩個(gè)菌落,能否繼續(xù)在陽性平皿上挑單克隆?
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轉(zhuǎn)化后涂布(已加抗生素),陰性對(duì)照培養(yǎng)皿上長有一兩個(gè)菌落,能否在陽性對(duì)照的平板上挑取單克隆,進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)(搖菌、保種、提質(zhì)粒、酶切鑒定。。。) 問題:陰性對(duì)照是不應(yīng)該長菌的,就算是一兩個(gè),但是它確實(shí)長了,性質(zhì)上說是染菌了,那么陽性對(duì)照的實(shí)驗(yàn)?zāi)芊窭^續(xù)?為什么? 如果可以的話,陰性對(duì)照上有一個(gè)兩染菌影響不大,那再多幾個(gè)呢?是按比例來算陽性平皿染菌的概率嗎? 陰性平皿上染有幾個(gè)菌的可能原因有什么? ( 空氣中的菌能存活?感受態(tài)細(xì)胞本身有污染?抗生素死活?.....(涂布棒是沒有問題的)有什么辦法可以避免? |

鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
| 陰性平板上長幾個(gè)克隆一般的原因是抗性板是篩選壓力稍有不足。出現(xiàn)這種情況的原因可能是抗生素母液部分失效或者到平板時(shí)加抗生素時(shí)培養(yǎng)基的溫度過高。你可以用新鮮的抗生素母液重新配置抗性板,如果還出現(xiàn)這種情況,還有可能是感受態(tài)細(xì)胞的問題。如果陽性實(shí)驗(yàn)平板上長的克隆比較多,可以繼續(xù)挑單克隆搖菌做進(jìn)一步驗(yàn)證。如果樣品實(shí)驗(yàn)板上長的克隆也很少,可能是實(shí)驗(yàn)本身出了問題。 |
新蟲 (正式寫手)
木蟲 (小有名氣)
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