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angel901216金蟲 (小有名氣)
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[求助]
HPLC總出現(xiàn)倒峰怎么回事
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| 用HPLC分析樣品時(shí)，330nm出現(xiàn)正常的譜圖，530出現(xiàn)的卻是倒峰，這是怎么回事呢？ |
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angel901216
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暫且不說別的，文獻(xiàn)只是參考，你永遠(yuǎn)無法具有和文獻(xiàn)相同的條件。這個(gè)你懂得。 既然在530nm處是倒峰說明樣本的吸光度小于流動(dòng)相，那檢查流動(dòng)相，流動(dòng)相是否有可以產(chǎn)生吸光度的物質(zhì)，也就是增加背景值的物質(zhì)，還有你用的流動(dòng)相溶劑的純度是否合格，不要只看標(biāo)簽純度，賣假貨的從來不貼假貨商標(biāo)。 那反過來，你的流動(dòng)相溶劑和文獻(xiàn)相同嗎，你的色譜柱和文獻(xiàn)一致嗎，這個(gè)你就理解為什么色譜柱出廠每根都要單獨(dú)出具檢測報(bào)告，同一廠家生產(chǎn)同批次還有差異。 液相色譜只關(guān)心這幾個(gè)參數(shù)，用何種類型色譜柱，流動(dòng)相配比，檢測波長，具體操作參數(shù)以實(shí)際待測物質(zhì)檢測為準(zhǔn)，可能流動(dòng)相會(huì)與文獻(xiàn)有差異，但只要分離就好，不能照搬，儀器分析貴在靈活應(yīng)用。 再者為何不掃描待測物質(zhì)，通過紫外圖譜確定檢測波長呢。紫外波長跟溶劑極性、PH等因素相關(guān)。 |
4樓2013-10-29 08:06:56
玻璃珠
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5樓2013-10-29 09:00:12
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