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angel901216金蟲 (小有名氣)
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[求助]
HPLC總出現(xiàn)倒峰怎么回事
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| 用HPLC分析樣品時,330nm出現(xiàn)正常的譜圖,530出現(xiàn)的卻是倒峰,這是怎么回事呢? |
鐵桿木蟲 (正式寫手)
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暫且不說別的,文獻只是參考,你永遠無法具有和文獻相同的條件。這個你懂得。 既然在530nm處是倒峰說明樣本的吸光度小于流動相,那檢查流動相,流動相是否有可以產生吸光度的物質,也就是增加背景值的物質,還有你用的流動相溶劑的純度是否合格,不要只看標簽純度,賣假貨的從來不貼假貨商標。 那反過來,你的流動相溶劑和文獻相同嗎,你的色譜柱和文獻一致嗎,這個你就理解為什么色譜柱出廠每根都要單獨出具檢測報告,同一廠家生產同批次還有差異。 液相色譜只關心這幾個參數(shù),用何種類型色譜柱,流動相配比,檢測波長,具體操作參數(shù)以實際待測物質檢測為準,可能流動相會與文獻有差異,但只要分離就好,不能照搬,儀器分析貴在靈活應用。 再者為何不掃描待測物質,通過紫外圖譜確定檢測波長呢。紫外波長跟溶劑極性、PH等因素相關。 |
鐵桿木蟲 (正式寫手)
金蟲 (小有名氣)
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