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juliajuhoon木蟲 (小有名氣)
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[求助]
液相前處理后空白樣品還是有很多雜質(zhì)
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我在做腸道菌群孵育藥品的實驗，但是無論怎么前處理，干擾還是很多。 處理方法1，用甲醇處理，具體步驟是：100微升空白腸菌培養(yǎng)液+100微升內(nèi)標(biāo)+800微升甲醇，渦旋1min，10000轉(zhuǎn)離心10min，取上清600微升40℃空氣吹干，殘余物用100微升流動相復(fù)溶。 2，用乙酸乙酯處理，具體步驟是：100微升空白腸菌培養(yǎng)液+100微升內(nèi)標(biāo)+800微升乙酸乙酯，渦旋1min，10000轉(zhuǎn)離心10min，取上清600微升40℃空氣吹干，殘余物用100微升流動相復(fù)溶。 我的藥物極性比較大，溶于水，所以一開始選擇用甲醇處理，但是在主峰周圍雜質(zhì)峰多，換成乙酸乙酯提取后，空白腸菌培養(yǎng)液的雜質(zhì)少了很多，但是藥物的提取回收率很低，都達(dá)不到70%。所以我又用甲醇和乙酸乙酯混合一起進(jìn)行前處理，但是空白情況下雜質(zhì)峰還是有很多。想要在15min內(nèi)完成一針進(jìn)樣，不然分析時間太長了。 請問大家有什么好的前處理辦法嗎？  |
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4樓2013-11-01 16:02:17
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