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applezhao金蟲 (小有名氣)
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[交流]
提取質(zhì)粒遇到多條帶，求助 已有10人參與
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大家好，想求助一下大家，我是在BL21里提取的質(zhì)粒，質(zhì)粒是PGEX-2T.第一張圖是第一次跟第二次提取的結(jié)果，我在網(wǎng)上查了一下說(shuō)可能是提取的過(guò)程中不夠輕柔，所以我第三次第四次（第二張圖）提取的時(shí)候注意了這些問(wèn)題，但是不知道怎么回事，就兩管出現(xiàn)了5000bp的片段，實(shí)在找不出原因了，求助，謝啦 第一張圖7個(gè)條帶的maker是DL10000，第二張maker也是DL10000 左邊是第二次提的質(zhì)粒右邊是第一次提的質(zhì)粒1.gif zl1.gif |
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 核酸生物學(xué)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn) |
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gyesang: 金幣+2, 鼓勵(lì)交流！ 2013-11-15 10:26:06
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提取出來(lái)的質(zhì)粒沒(méi)有做酶切，直接去跑電泳只能說(shuō)明你有么有提到質(zhì)粒。你若要判斷它的真實(shí)大小，就要先在酶切，然后去跑電泳。 因?yàn)�，你提取出�?lái)的質(zhì)粒的螺旋程度不一樣，條帶就會(huì)有多條。即使你提出來(lái)的質(zhì)粒只有一種，條帶也可能有多條。 所以，你在質(zhì)粒上選個(gè)只有一個(gè)酶切位點(diǎn)的酶進(jìn)行酶切，然后把酶切產(chǎn)物拿去跑電泳。若在5000bp處有條帶，就說(shuō)明你提的是成功的。 |
2樓2013-11-14 18:54:05
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6樓2013-11-14 22:18:05
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