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分光光度計法測定脂氧合酶活性，求助！ 已有1人參與
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用下面方法配制的亞油酸底物溶液： 10mg亞麻酸,用無水乙醇溶解定容至 7mL,并加入0. 2 mL吐溫-20,接著用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將乙醇蒸干。再用15 mL 0. 05 mol/L的Na2HPO4溶液溶解,為了保持底物溶液的澄清而用 1 mol/LNaOH溶液滴定至pH9. 0（但是我沒有覺得出現(xiàn)過渾濁）最后用pH值為6.5，0. 2mol/L的磷酸緩沖液將其稀釋10倍即為反應(yīng)底物溶液。所得底物每3ml分裝在離心管中，儲藏在-20℃條件下備用。 配置好后，在用分光光度計測定時，在調(diào)零那步就出現(xiàn)問題。兩個石英比色皿加入底物溶液和0.1ml緩沖液后，在234nm下讀數(shù)很不穩(wěn)定，在+0.1到-0.3范圍內(nèi)波動，無法調(diào)零。不知道為什么，但是在大于300nm條件下同樣的底物溶液沒有出現(xiàn)這樣的情況。求大神解救！~ [ Last edited by 木蟲/panda on 2014-5-21 at 22:32 ] |
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