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anna87新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
表達(dá)載體的選擇及連接 已有1人參與
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| 目的基因連到PMD18-T。轉(zhuǎn)化DH5α,挑菌斑搖菌測(cè)序正確,再怎么連到表達(dá)載體上 需要準(zhǔn)備什么 謝謝 |
榮譽(yù)版主 (著名寫(xiě)手)
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專家經(jīng)驗(yàn): +24 |

鐵桿木蟲(chóng) (文壇精英)
銀蟲(chóng) (小有名氣)
鐵桿木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
| 如果要做表達(dá),目的基因如果是PCR獲得,先要測(cè)序,序列正確后可以做進(jìn)一步克隆。根據(jù)你要做表達(dá)的體系考慮是否有稀有密碼子。如果有,需要替換才能高效表達(dá)。一般在設(shè)計(jì)基因表達(dá)時(shí),在第一步PCR設(shè)計(jì)引物時(shí)就要考慮連到什么表達(dá)載體里,選擇合適的酶切位點(diǎn)克隆。因?yàn)樽鲆淮蜳CR,就可能有堿基錯(cuò)配的可能,盡量避免反復(fù)PCR來(lái)獲取基因。 |
金蟲(chóng) (小有名氣)
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Grand777 2026-03-21 | 3/150 |
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然11 2026-03-19 | 4/200 |
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