 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 2954 | 回復: 16 | |||
夏天的普洱茶木蟲 (著名寫手)
|
[求助]
目的片段和T載體連接后PCR條帶詭異
|
||
| 我的目的片段大概有1200左右，連接到T載體后做藍白斑篩選，挑取多個白斑提取質(zhì)粒以后做PCR，結(jié)果P出來3條條帶，分別是500，1500，3000，有人知道這是什么情況嗎？求解答 |
回復此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設(shè)計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有76人回復
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經(jīng)有0人回復
-
留學--博士招生
已經(jīng)有16人回復
-
化學工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復
-
邵陽學院食品與化學工程學院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 構(gòu)建載體后，菌液PCR，沒有目的條帶�。�！
已經(jīng)有10人回復
- 目的基因連接表達載體的質(zhì)粒PCR驗證，結(jié)果出現(xiàn)2條帶
已經(jīng)有10人回復
- PCR連接T載體測序正確，提質(zhì)粒卻是2600多，是T載體那么大的分子量，為什么啊/
已經(jīng)有3人回復
- 10kb的pcr產(chǎn)物能連到T載體上嗎
已經(jīng)有17人回復
- pcr產(chǎn)物膠回收濃度低，能不能和T載體連接
已經(jīng)有16人回復
- PCR片段與載體連接不上
已經(jīng)有6人回復
- 熒光定量pcr溶解曲線好幾個峰，但是電泳只有一條目的條帶，怎么回事
已經(jīng)有5人回復
- 急!要連表達載體的目的片段可以是PCR后回收的產(chǎn)物嗎？已經(jīng)連中間載體驗證過了
已經(jīng)有3人回復
- 高保真酶PCR產(chǎn)物連接pMD-19T載體，DH5a感受態(tài)，怎么總是連接不上
已經(jīng)有26人回復
- PCR陽性檢測結(jié)果，空載體和水都能擴的出來，怎么回事呢？
已經(jīng)有4人回復
- 載體連接pcr片段一直連不上
已經(jīng)有17人回復
- 兼并引物PCR連T載體后，怎么鑒定有沒有連上
已經(jīng)有20人回復
- 求助��！轉(zhuǎn)質(zhì)粒出現(xiàn)問題了！
已經(jīng)有13人回復
- PCR產(chǎn)物與T載體連不上 求助
已經(jīng)有29人回復
- 【求助/交流】pGEM-T Easy載體 T-A 連接 為啥沒連入PCR產(chǎn)物的 菌斑是藍斑
已經(jīng)有23人回復
- 【求助/交流】為什么我的PCR產(chǎn)物總是連接不上T載體
已經(jīng)有26人回復
- 【求助/交流】測序問題
已經(jīng)有8人回復
- 【求助/交流】TA克隆
已經(jīng)有15人回復
- 【求助/交流】PCR產(chǎn)物與T載體的連接的實驗原理？
已經(jīng)有5人回復
【答案】應助回帖
★ ★ ★
感謝參與，應助指數(shù) +1
夏天的普洱茶: 金幣+3, ★★★很有幫助 2013-05-22 13:41:22
感謝參與，應助指數(shù) +1
夏天的普洱茶: 金幣+3, ★★★很有幫助 2013-05-22 13:41:22
|
推測原因: 1) 不是單菌落擴增結(jié)果?! 2) 引物擴增不特異!你的引物在片段上和載體上都有,不是載體上引物吧? 建議: 1) 載體說明上應該有檢測引物序列RV-M/M13-47,用這對引物擴增檢測試一試吧! 2) 或提出質(zhì)粒后直接酶切鑒定,就可以,判定是否含目的基因. 3) 如果就想PCR鑒定,請設(shè)定對照或心中有數(shù): 考慮一下你的質(zhì)粒全長多少? 質(zhì)粒全長: pMD19-T 約2700bp+片段1200bp?=3900bp? 空載應該擴出多大片段?(擴增時可以用空載質(zhì)粒做個陰性對照) 目的質(zhì)粒應該擴出多大片段? 設(shè)定對照再分析就容易找出原因! |
13樓2013-05-22 13:15:47
stevenshi021
新蟲 (小有名氣)
- 應助: 61 (初中生)
- 金幣: 545.3
- 紅花: 5
- 帖子: 276
- 在線: 35.1小時
- 蟲號: 2272292
- 注冊: 2013-02-03
- 專業(yè): 生物化學
2樓2013-05-20 11:12:34
3樓2013-05-20 11:27:49
夏天的普洱茶
木蟲 (著名寫手)
- 應助: 69 (初中生)
- 金幣: 5116.5
- 紅花: 18
- 帖子: 1048
- 在線: 441.4小時
- 蟲號: 1427657
- 注冊: 2011-10-05
- 性別: MM
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學
4樓2013-05-20 13:20:52
夏天的普洱茶
木蟲 (著名寫手)
- 應助: 69 (初中生)
- 金幣: 5116.5
- 紅花: 18
- 帖子: 1048
- 在線: 441.4小時
- 蟲號: 1427657
- 注冊: 2011-10-05
- 性別: MM
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學
5樓2013-05-20 13:23:17
gyesang
榮譽版主 (著名寫手)
-
專家經(jīng)驗: +24 - MolEPI: 31
- 應助: 599 (博士)
- 貴賓: 2.689
- 金幣: 24334.9
- 散金: 1088
- 紅花: 88
- 沙發(fā): 2
- 帖子: 2327
- 在線: 623.1小時
- 蟲號: 849017
- 注冊: 2009-09-16
- 性別: GG
- 專業(yè): 細胞信號轉(zhuǎn)導
- 管轄: 分子生物
6樓2013-05-20 16:30:33
夏天的普洱茶
木蟲 (著名寫手)
- 應助: 69 (初中生)
- 金幣: 5116.5
- 紅花: 18
- 帖子: 1048
- 在線: 441.4小時
- 蟲號: 1427657
- 注冊: 2011-10-05
- 性別: MM
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學
7樓2013-05-20 16:44:30
gyesang
榮譽版主 (著名寫手)
-
專家經(jīng)驗: +24 - MolEPI: 31
- 應助: 599 (博士)
- 貴賓: 2.689
- 金幣: 24334.9
- 散金: 1088
- 紅花: 88
- 沙發(fā): 2
- 帖子: 2327
- 在線: 623.1小時
- 蟲號: 849017
- 注冊: 2009-09-16
- 性別: GG
- 專業(yè): 細胞信號轉(zhuǎn)導
- 管轄: 分子生物
8樓2013-05-20 17:12:17
9樓2013-05-20 17:16:56
夏天的普洱茶
木蟲 (著名寫手)
- 應助: 69 (初中生)
- 金幣: 5116.5
- 紅花: 18
- 帖子: 1048
- 在線: 441.4小時
- 蟲號: 1427657
- 注冊: 2011-10-05
- 性別: MM
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學
10樓2013-05-20 17:30:23
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 夏天的普洱茶 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 材料與化工272求調(diào)劑 +16 | 阿斯蒂芬2004 2026-03-28 | 16/800 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 281求調(diào)劑 +4 | 亞克西good 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
[考研] 化學0703 調(diào)劑 306分 一志愿211 +7 | 26要上岸 2026-03-28 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 化學工程085602 305分求調(diào)劑 +22 | RichLi_ 2026-03-25 | 22/1100 |
|
|
|
[考研] 一志愿：西北大學，英一數(shù)一408-284分求調(diào)劑 +4 | 12.27 2026-03-27 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料學碩333求調(diào)劑 +11 | 北道巷 2026-03-24 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑求院校招收 +6 | 鶴鯨鴿 2026-03-28 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑考研 +3 | 王杰一 2026-03-29 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 347求調(diào)劑 +3 | 山頂見α 2026-03-25 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 322求調(diào)劑 +5 | 舊吢 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 085405 考的11408求各位老師帶走 +3 | Qiu學ing 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 291求調(diào)劑 +6 | HanBeiNingZC 2026-03-24 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 085404求調(diào)劑，總分309，本科經(jīng)歷較為豐富 +4 | 來財aa 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿吉大071010，316分求調(diào)劑 +3 | xgbiknn 2026-03-27 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 276求調(diào)劑。有半年電池和半年高分子實習經(jīng)歷 +10 | 材料學257求調(diào)劑 2026-03-23 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 336材料求調(diào)劑 +7 | 陳瀅瑩 2026-03-26 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 打過很多競賽，085406控制工程300分，求調(diào)劑 +3 | askeladz 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 【2026考研調(diào)劑】制藥工程 284分 求相關(guān)專業(yè)調(diào)劑名額 +4 | 袁奐奐 2026-03-25 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 材料專碩331求調(diào)劑 +4 | 鮮當牛 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研]
 085404電子信息284分求調(diào)劑
+4
|
13659058978 2026-03-24 | 4/200 |
|