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[交流]
有沒(méi)有各個(gè)HPLC檢測(cè)器能用來(lái)檢測(cè)什么物質(zhì)的詳細(xì)介紹的資料 已有3人參與
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| RT.不知道組內(nèi)大牛們有沒(méi)有介紹例如ELSD，DAD，F(xiàn)LD等各個(gè)HPLC的檢測(cè)器（detector）能用來(lái)檢測(cè)什么物質(zhì)的詳細(xì)資料說(shuō)明~謝謝啦！ |
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lpl1937
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3樓2013-11-26 18:05:36
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2樓2013-11-26 15:58:34
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1)紫外可見(jiàn)吸收檢測(cè)器(UV-Vis) UV-Vis檢測(cè)器是目前HPLC中應(yīng)用最廣泛的檢測(cè)器，簡(jiǎn)稱(chēng)紫外檢測(cè)器。這種檢測(cè)器靈敏度高，線(xiàn)性范圍寬，對(duì)流速和溫度變化不敏感，可用于梯度洗脫分離。紫外檢測(cè)器要求被檢樣品組分在紫外或可見(jiàn)光區(qū)有吸收，而使用的流動(dòng)相無(wú)紫外吸收或紫外吸收波長(zhǎng)與被檢組分紫外吸收波長(zhǎng)不同，在被檢組分紫外吸收波長(zhǎng)處沒(méi)有吸收。紫外檢測(cè)器屬選擇性檢測(cè)器，同時(shí)它是非破壞性檢測(cè)器，可用于制備色譜。 (2)光電二極管陣列檢測(cè)器(PAD或DAD) 普通的UV-Vis檢測(cè)器只能測(cè)定某一波長(zhǎng)時(shí)吸光度與時(shí)間關(guān)系曲線(xiàn)，即只能作二維圖譜。要測(cè)定某組分的紫外可見(jiàn)吸收光譜圖，需采用“停留掃描”的方法，PAD能夠同時(shí)測(cè)定吸光度、時(shí)間、波長(zhǎng)三者的關(guān)系，通過(guò)計(jì)算機(jī)處理，可以得到三維圖譜，也可做出任意波長(zhǎng)的吸光度-時(shí)間曲線(xiàn)(色譜圖)和任意時(shí)間的吸光度-波長(zhǎng)曲線(xiàn)(紫外可見(jiàn)光譜圖)。PAD的一個(gè)重要用途是峰純度檢驗(yàn)。 (3)示差折光檢測(cè)器(RID) RID也稱(chēng)光折射檢測(cè)器，是一種通用型檢測(cè)器。基于連續(xù)測(cè)定色譜柱流出物光折射率的變化而用于測(cè)定溶質(zhì)濃度。溶液的光折射率是溶劑(流動(dòng)相)和溶質(zhì)各自的折射率乘以其物質(zhì)的濃度之和，溶有樣品的流動(dòng)相和流動(dòng)相本身之間光折射率之差即表示樣品在流動(dòng)相中的濃度。原則上凡是與流動(dòng)相光折射率有差別的樣品都可用它來(lái)測(cè)定。其檢測(cè)限可達(dá)10-6 - 10-7g/mL，一般不能用于梯度分析。 (4)蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(ELSD) ELSD是一種質(zhì)量型檢測(cè)器，它可以用來(lái)檢測(cè)任何不揮發(fā)性化合物，包括氨基酸、脂肪酸、糖類(lèi)、表面活性劑等，尤其對(duì)一些較難分析的樣品，如磷脂、皂苷、生物堿、甾族化合物等無(wú)紫外吸收或紫外末端吸收的化合物更具有其他HPLC檢測(cè)器無(wú)法比擬的優(yōu)越性。此外，ELSD對(duì)流動(dòng)相的組成不敏感，可以用于梯度洗脫。ELSD的檢測(cè)靈敏度要高于低波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器和示差折光檢測(cè)器，檢測(cè)限可低至于10-10g。 (5)熒光檢測(cè)器(FLD) 許多化合物，特別是芳香族化合物、生化物質(zhì)，如有機(jī)胺、維生素、激素、酶等被入射的紫外光照射后，能吸收一定波長(zhǎng)的光，使原子中的某些電子從基態(tài)中的最低振動(dòng)能級(jí)躍遷到較高電子能態(tài)的某些振動(dòng)能級(jí)，之后，由于電子在分子中的碰撞，消耗一定的能量而下降到第一電子激發(fā)態(tài)的最低振動(dòng)能級(jí)，再躍遷回到基態(tài)中的某些不同振動(dòng)能級(jí)，同時(shí)發(fā)射出比原來(lái)所吸收的光頻率較低、波長(zhǎng)較長(zhǎng)的光，即熒光。被這些物質(zhì)吸收的光稱(chēng)為激發(fā)光(λex)，產(chǎn)生的熒光稱(chēng)為發(fā)射光(λem)。熒光的強(qiáng)度與入射光強(qiáng)度、量子效率、樣品濃度成正比。FLD的最大優(yōu)點(diǎn)是的高靈敏度和良好的選擇性。一般來(lái)說(shuō)，它比紫外吸收檢測(cè)器的靈敏度要高10-1000倍，可達(dá)mg/L級(jí)，而且它所需要的試樣很少，因此在藥物和生化分析中有著廣泛的用途。 (6)電導(dǎo)檢測(cè)器(CD) CD是離子色譜中使用最廣泛的檢測(cè)器，其原理是用兩個(gè)對(duì)電極測(cè)量水溶液中離子型溶質(zhì)的電導(dǎo)，由電導(dǎo)的變化測(cè)定淋洗液中溶質(zhì)濃度。這種檢測(cè)器的死體積小，如采用抑制電導(dǎo)法，其靈敏度可達(dá)10-8 g/mL，線(xiàn)性動(dòng)態(tài)范圍為103。 (7)安培檢測(cè)器(AD) AD采用固體工作電極，電極可用于較高的正電位，故能檢測(cè)氧化還原性物質(zhì)，適用范圍很寬。AD結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，池體積小，響應(yīng)快，噪聲低，靈敏度高。但是由于電極表面容易被污染，需要經(jīng)常拋光更新。AD有直流、脈沖和積分之分，也是離子色譜常用的檢測(cè)器之一。 (8)質(zhì)譜檢測(cè)器(MSD) 一般是指HPLC-MS或HPLC-MS/MS等聯(lián)用，通常作為結(jié)構(gòu)測(cè)定或化合物鑒定等使用。有極高的靈敏度和分辨率。目前流行的接口是電噴霧離子化（ESI）和大氣壓化學(xué)電離（APCI），并有正負(fù)二種離子方式，應(yīng)用范圍極其廣泛。 其它HPLC檢測(cè)器還有： (9)化學(xué)反應(yīng)檢測(cè)器 也就是將被檢物質(zhì)進(jìn)行某種化學(xué)反應(yīng)(衍生反應(yīng)，酶反應(yīng)等)后再用高靈敏度的某種檢測(cè)器檢測(cè)。如氨基酸分析儀，固相化學(xué)反應(yīng)檢測(cè)器(固定化酶反應(yīng)器)等。 (10)介電常數(shù)檢測(cè)器 介電常數(shù)檢測(cè)器是一種通用型檢測(cè)器，靈敏度低，通用性強(qiáng)。其工作原理是：隨流動(dòng)相中流出組分的改變，其介電常數(shù)、電容量也改變，因此測(cè)定流動(dòng)相的電容量變化，即可檢測(cè)組分的變化。介電常數(shù)檢測(cè)器性能類(lèi)似于RID，但其應(yīng)用不如后者普遍。 (11)電位測(cè)定檢測(cè)器 電位測(cè)定檢測(cè)器利用離子選擇電極測(cè)定流出液的電位，流出液組成改變，電位也發(fā)生變化。使用不同的離子選擇電極(如鹵離子電極，銀離子電極等)可測(cè)定不同的離子濃度變化情況。 (12)放射性檢測(cè)器 放射性檢測(cè)器是一種檢測(cè)流動(dòng)相中有放射性標(biāo)記組分的特殊檢測(cè)器。其響應(yīng)范圍很寬，對(duì)沒(méi)放射性的流動(dòng)相成分的改變不敏感，可有效地使用梯度洗脫技術(shù)。 (13)光電導(dǎo)檢測(cè)器 光電導(dǎo)檢測(cè)器是利用某些化合物受強(qiáng)烈紫外光照射引起光電離形成離子的現(xiàn)象，在電導(dǎo)池中檢測(cè)。這種檢測(cè)器對(duì)鹵代物和許多含硫和氮的光敏化合物有選擇性響應(yīng)。光電導(dǎo)檢測(cè)器對(duì)某些化合物的靈敏度比紫外-可見(jiàn)光吸收檢測(cè)器還高，兩者線(xiàn)性范圍相當(dāng)。 (14)紅外光譜檢測(cè)器 紅外檢測(cè)器可用作HPLC的選擇性檢測(cè)。這種方法主要用于凝膠色譜，且只能用于流動(dòng)相對(duì)所用紅外波長(zhǎng)沒(méi)有吸收的體系。目前應(yīng)用較多的是傅里葉變換紅外光譜檢測(cè)器，即HPLC-FTIR聯(lián)用，由于掃描速度快，不用停留就可以得到每一個(gè)色譜峰的紅外光譜圖。 （15）庫(kù)侖陣列電化學(xué)檢測(cè)器 庫(kù)侖陣列電化學(xué)是一種新型的檢測(cè)器，靈敏度非常高（10－15），用于測(cè)定電化學(xué)活性物質(zhì)，可得到三維的色譜圖（時(shí)間、電勢(shì)、濃度）。 （16）粘度檢測(cè)器 粘度檢測(cè)器主要用于凝膠色譜中測(cè)定高分子的相對(duì)分子量。 |
4樓2013-11-26 20:34:36
5樓2013-11-28 07:39:03
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