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fluffylee版主
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[交流]
有沒有各個HPLC檢測器能用來檢測什么物質(zhì)的詳細(xì)介紹的資料 已有3人參與
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| RT.不知道組內(nèi)大牛們有沒有介紹例如ELSD，DAD，F(xiàn)LD等各個HPLC的檢測器（detector）能用來檢測什么物質(zhì)的詳細(xì)資料說明~謝謝啦！ |
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fluffylee
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1)紫外可見吸收檢測器(UV-Vis) UV-Vis檢測器是目前HPLC中應(yīng)用最廣泛的檢測器，簡稱紫外檢測器。這種檢測器靈敏度高，線性范圍寬，對流速和溫度變化不敏感，可用于梯度洗脫分離。紫外檢測器要求被檢樣品組分在紫外或可見光區(qū)有吸收，而使用的流動相無紫外吸收或紫外吸收波長與被檢組分紫外吸收波長不同，在被檢組分紫外吸收波長處沒有吸收。紫外檢測器屬選擇性檢測器，同時它是非破壞性檢測器，可用于制備色譜。 (2)光電二極管陣列檢測器(PAD或DAD) 普通的UV-Vis檢測器只能測定某一波長時吸光度與時間關(guān)系曲線，即只能作二維圖譜。要測定某組分的紫外可見吸收光譜圖，需采用“停留掃描”的方法，PAD能夠同時測定吸光度、時間、波長三者的關(guān)系，通過計算機(jī)處理，可以得到三維圖譜，也可做出任意波長的吸光度-時間曲線(色譜圖)和任意時間的吸光度-波長曲線(紫外可見光譜圖)。PAD的一個重要用途是峰純度檢驗。 (3)示差折光檢測器(RID) RID也稱光折射檢測器，是一種通用型檢測器。基于連續(xù)測定色譜柱流出物光折射率的變化而用于測定溶質(zhì)濃度。溶液的光折射率是溶劑(流動相)和溶質(zhì)各自的折射率乘以其物質(zhì)的濃度之和，溶有樣品的流動相和流動相本身之間光折射率之差即表示樣品在流動相中的濃度。原則上凡是與流動相光折射率有差別的樣品都可用它來測定。其檢測限可達(dá)10-6 - 10-7g/mL，一般不能用于梯度分析。 (4)蒸發(fā)光散射檢測器(ELSD) ELSD是一種質(zhì)量型檢測器，它可以用來檢測任何不揮發(fā)性化合物，包括氨基酸、脂肪酸、糖類、表面活性劑等，尤其對一些較難分析的樣品，如磷脂、皂苷、生物堿、甾族化合物等無紫外吸收或紫外末端吸收的化合物更具有其他HPLC檢測器無法比擬的優(yōu)越性。此外，ELSD對流動相的組成不敏感，可以用于梯度洗脫。ELSD的檢測靈敏度要高于低波長紫外檢測器和示差折光檢測器，檢測限可低至于10-10g。 (5)熒光檢測器(FLD) 許多化合物，特別是芳香族化合物、生化物質(zhì)，如有機(jī)胺、維生素、激素、酶等被入射的紫外光照射后，能吸收一定波長的光，使原子中的某些電子從基態(tài)中的最低振動能級躍遷到較高電子能態(tài)的某些振動能級，之后，由于電子在分子中的碰撞，消耗一定的能量而下降到第一電子激發(fā)態(tài)的最低振動能級，再躍遷回到基態(tài)中的某些不同振動能級，同時發(fā)射出比原來所吸收的光頻率較低、波長較長的光，即熒光。被這些物質(zhì)吸收的光稱為激發(fā)光(λex)，產(chǎn)生的熒光稱為發(fā)射光(λem)。熒光的強(qiáng)度與入射光強(qiáng)度、量子效率、樣品濃度成正比。FLD的最大優(yōu)點是的高靈敏度和良好的選擇性。一般來說，它比紫外吸收檢測器的靈敏度要高10-1000倍，可達(dá)mg/L級，而且它所需要的試樣很少，因此在藥物和生化分析中有著廣泛的用途。 (6)電導(dǎo)檢測器(CD) CD是離子色譜中使用最廣泛的檢測器，其原理是用兩個對電極測量水溶液中離子型溶質(zhì)的電導(dǎo)，由電導(dǎo)的變化測定淋洗液中溶質(zhì)濃度。這種檢測器的死體積小，如采用抑制電導(dǎo)法，其靈敏度可達(dá)10-8 g/mL，線性動態(tài)范圍為103。 (7)安培檢測器(AD) AD采用固體工作電極，電極可用于較高的正電位，故能檢測氧化還原性物質(zhì)，適用范圍很寬。AD結(jié)構(gòu)簡單，池體積小，響應(yīng)快，噪聲低，靈敏度高。但是由于電極表面容易被污染，需要經(jīng)常拋光更新。AD有直流、脈沖和積分之分，也是離子色譜常用的檢測器之一。 (8)質(zhì)譜檢測器(MSD) 一般是指HPLC-MS或HPLC-MS/MS等聯(lián)用，通常作為結(jié)構(gòu)測定或化合物鑒定等使用。有極高的靈敏度和分辨率。目前流行的接口是電噴霧離子化（ESI）和大氣壓化學(xué)電離（APCI），并有正負(fù)二種離子方式，應(yīng)用范圍極其廣泛。 其它HPLC檢測器還有： (9)化學(xué)反應(yīng)檢測器 也就是將被檢物質(zhì)進(jìn)行某種化學(xué)反應(yīng)(衍生反應(yīng)，酶反應(yīng)等)后再用高靈敏度的某種檢測器檢測。如氨基酸分析儀，固相化學(xué)反應(yīng)檢測器(固定化酶反應(yīng)器)等。 (10)介電常數(shù)檢測器 介電常數(shù)檢測器是一種通用型檢測器，靈敏度低，通用性強(qiáng)。其工作原理是：隨流動相中流出組分的改變，其介電常數(shù)、電容量也改變，因此測定流動相的電容量變化，即可檢測組分的變化。介電常數(shù)檢測器性能類似于RID，但其應(yīng)用不如后者普遍。 (11)電位測定檢測器 電位測定檢測器利用離子選擇電極測定流出液的電位，流出液組成改變，電位也發(fā)生變化。使用不同的離子選擇電極(如鹵離子電極，銀離子電極等)可測定不同的離子濃度變化情況。 (12)放射性檢測器 放射性檢測器是一種檢測流動相中有放射性標(biāo)記組分的特殊檢測器。其響應(yīng)范圍很寬，對沒放射性的流動相成分的改變不敏感，可有效地使用梯度洗脫技術(shù)。 (13)光電導(dǎo)檢測器 光電導(dǎo)檢測器是利用某些化合物受強(qiáng)烈紫外光照射引起光電離形成離子的現(xiàn)象，在電導(dǎo)池中檢測。這種檢測器對鹵代物和許多含硫和氮的光敏化合物有選擇性響應(yīng)。光電導(dǎo)檢測器對某些化合物的靈敏度比紫外-可見光吸收檢測器還高，兩者線性范圍相當(dāng)。 (14)紅外光譜檢測器 紅外檢測器可用作HPLC的選擇性檢測。這種方法主要用于凝膠色譜，且只能用于流動相對所用紅外波長沒有吸收的體系。目前應(yīng)用較多的是傅里葉變換紅外光譜檢測器，即HPLC-FTIR聯(lián)用，由于掃描速度快，不用停留就可以得到每一個色譜峰的紅外光譜圖。 （15）庫侖陣列電化學(xué)檢測器 庫侖陣列電化學(xué)是一種新型的檢測器，靈敏度非常高（10－15），用于測定電化學(xué)活性物質(zhì)，可得到三維的色譜圖（時間、電勢、濃度）。 （16）粘度檢測器 粘度檢測器主要用于凝膠色譜中測定高分子的相對分子量。 |
4樓2013-11-26 20:34:36
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