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kinner.huang金蟲 (正式寫手)
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[求助]
關(guān)于設(shè)計(jì)引物 已有1人參與
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| 我想研究一個(gè)基因的variant，因第8外顯子缺失，請(qǐng)問(wèn)各路大俠，如果想PCR得到的只是這個(gè)特定的variant而不是這個(gè)基因的其他variants，是否可以設(shè)計(jì)個(gè)引物正好是跨第7和第9外顯子的？可否指導(dǎo)一二？謝謝！ |
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jurkat.1640
至尊木蟲 (文壇精英)
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
kx444555: 金幣+3, 鼓勵(lì)交流 2013-12-19 16:21:17
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kx444555: 金幣+3, 鼓勵(lì)交流 2013-12-19 16:21:17
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如果后面還有第9外顯子的話就可以設(shè)計(jì)引物。 一種方法是引物直接跨7、9外顯子 另一種方法是在第8外顯子兩邊設(shè)計(jì)引物，因?yàn)槿绷艘粋�(gè)外顯子，擴(kuò)增片段長(zhǎng)度較小。設(shè)計(jì)適當(dāng)?shù)腜CR產(chǎn)物長(zhǎng)度，比如一個(gè)基因PCR產(chǎn)物大于500 bp，另外一種PCR產(chǎn)物小于500 bp，就可以從500 bp的marker分辨出2種不同的mRNA。 |
2樓2013-12-19 11:35:27
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