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檸檬可樂(lè)星新蟲(chóng) (小有名氣)
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頭疼的測(cè)序結(jié)果 已有1人參與
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各位大神：前兩天我測(cè)了一段LSU的序列，是克隆后送測(cè)的，使用的載體是pMD19-T，菌落PCR的條帶位置大約是750bp。我要求用M13F正向測(cè)序，結(jié)果卻得到了1133bp的序列，在NCBI里blast，都是 “Expression vector pECIA-14, complete sequence ”之類的結(jié)果。當(dāng)時(shí)我就郁悶了，以為自己沒(méi)做對(duì)，然后用我自己的特異性引物在得到的序列里比對(duì)一下，居然找到了上游引物，然后我從引物位置往后選了400多bp序列又在NCBI里blast，得到的是我所做的那個(gè)屬的序列信息。然后我就混亂了 請(qǐng)問(wèn)有沒(méi)有那個(gè)大蝦也遇到過(guò)這種情況的�。壳笾更c(diǎn) 到底是什么原因 |
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鐵桿木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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3樓2014-01-01 06:09:00
檸檬可樂(lè)星
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5樓2014-01-01 10:57:38
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