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glfcpu銀蟲 (小有名氣)
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[交流]
關(guān)于用某種離子交換純化蛋白時(shí)，如何測(cè)定該蛋白的動(dòng)態(tài)載樣量？ 已有4人參與
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關(guān)于這個(gè)問題自己查了很多資料，比較主流的說法是——“將待純化的原始料液（不是純蛋白），不停的進(jìn)行上樣，每管進(jìn)行穿透收集，進(jìn)行測(cè)定目標(biāo)蛋白濃度，當(dāng)穿透中的目標(biāo)蛋白濃度為原始料液濃度的10%時(shí)就是10%穿透的載量。" 小蟲在此提出兩個(gè)問題，請(qǐng)各位同行探討并指點(diǎn)： 1）關(guān)于這里的原始料液該如何理解，因?yàn)橥ǔｋx子交換時(shí)需要調(diào)節(jié)上樣液的pH和離子強(qiáng)度，使之接近于工作液（A相），所以這里的原始料液是否指調(diào)節(jié)過后的液體（通常是稀釋液體）？ 2）上述提及的目標(biāo)蛋白濃度為原始料液濃度的10%，這個(gè)該如何準(zhǔn)確定量呢，是否可以簡單理解為層析柱末端流出液的吸收值增值原始料液的紫外吸收值的10%？ |
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5樓2014-02-20 12:10:55
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