 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 10 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 3011 | 回復(fù): 9 | ||
[求助]
蛋白純化的高手指點(diǎn)呀，陽離子交換層析的條件選擇
|
| 我需要純化的目的蛋白等電點(diǎn)為9.0，想用CM Sepharose F F柱純化，之前的師兄用的是0-1M NaCL的50mM，pH 4.5 的NaAC的緩沖液線性梯度洗脫，可是我看群里討論的多數(shù)使用磷酸鹽緩沖液，想問問這兩種不同的緩沖液有什么區(qū)別呢？是不是分離蛋白的效果不同呀！ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有273人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有15人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 離子交換層析求助
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 蛋白純化遇到問題
已經(jīng)有22人回復(fù)
- 蛋白質(zhì)純化凝膠層析
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 求助離子交換柱的選擇？
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 蛋白互作必會(huì)，GST純化遇到的問題
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 一種蛋白能先用陽離子交換層析再用陰離子交換層析嗎
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 使用DEAE Sepharose Fast Flow陰離子交換層析純化蛋白后雜蛋白的洗脫
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 蛋白純化分離問題
已經(jīng)有19人回復(fù)
- 【求助】陽離子交換樹脂的回收純化方法
已經(jīng)有19人回復(fù)
- 【分享】蛋白質(zhì)純化個(gè)人總結(jié)2
已經(jīng)有38人回復(fù)
- 【求助/交流】離子交換層析
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 【求助】請問陽離子交換層析柱如何清洗
已經(jīng)有11人回復(fù)
lihuan0525
金蟲 (職業(yè)作家)
- 應(yīng)助: 565 (博士)
- 金幣: 2145
- 散金: 687
- 紅花: 15
- 帖子: 3299
- 在線: 551.8小時(shí)
- 蟲號: 1292024
- 注冊: 2011-05-11
- 性別: GG
- 專業(yè): 蛋白質(zhì)組學(xué)
2樓2013-02-27 13:15:06
gaojuan1985
新蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 57 (初中生)
- 金幣: 75.5
- 散金: 839
- 紅花: 8
- 帖子: 561
- 在線: 119.6小時(shí)
- 蟲號: 1374933
- 注冊: 2011-08-21
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物化學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
yuanalice: 金幣+3, ★★★很有幫助 2013-02-28 01:11:35
gyesang: 金幣+2, 鼓勵(lì)應(yīng)助！ 2013-03-01 01:13:13
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
yuanalice: 金幣+3, ★★★很有幫助 2013-02-28 01:11:35
gyesang: 金幣+2, 鼓勵(lì)應(yīng)助！ 2013-03-01 01:13:13
| 你的蛋白質(zhì)等電點(diǎn)是9.0，而你要用4.5的緩沖液，相差這么多，你不怕你的蛋白質(zhì)不穩(wěn)定嗎？一般來說，離子交換的時(shí)候，偏離開等電點(diǎn)1-2個(gè)pH就足夠了，pH相差越大，蛋白質(zhì)反而不穩(wěn)定。因此，建議你嘗試pH7.0的緩沖液，Tirs-HCl、磷酸鹽緩沖液或者HEPES，都可以。 |
3樓2013-02-27 13:50:00
4樓2013-02-28 01:11:17
gaojuan1985
新蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 57 (初中生)
- 金幣: 75.5
- 散金: 839
- 紅花: 8
- 帖子: 561
- 在線: 119.6小時(shí)
- 蟲號: 1374933
- 注冊: 2011-08-21
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物化學(xué)
★ ★
kx444555: 金幣+2, 鼓勵(lì)交流 2013-02-28 10:40:03
kx444555: 金幣+2, 鼓勵(lì)交流 2013-02-28 10:40:03
| 你的蛋白等電點(diǎn)不是9.0嗎？難道是你寫錯(cuò)了或者我看錯(cuò)了？總之是采用的緩沖液最好不要超過等電點(diǎn)太遠(yuǎn)，否則蛋白質(zhì)是不穩(wěn)定的，一般來說，我都用偏離1.5左右，如果要確保離子交換能吸附上，那么兩個(gè)pH的偏差也足夠了。如果PI=9.0，而你用pH=4.5的話，第一是蛋白不一定穩(wěn)定（只是不一定，具體是不是這樣因蛋白而論），第二，在離子交換上吸附太牢固，不容易洗脫下來。而且會(huì)有更多的雜質(zhì)吸附上去，不合算。 |
5樓2013-02-28 08:39:07
6樓2013-02-28 10:08:53
7樓2013-02-28 15:00:58
kedaxiaoyu
木蟲 (職業(yè)作家)
神蟲浮云
- 應(yīng)助: 84 (初中生)
- 金幣: 4809.5
- 散金: 776
- 紅花: 19
- 沙發(fā): 110
- 帖子: 3858
- 在線: 2108.7小時(shí)
- 蟲號: 1675631
- 注冊: 2012-03-08
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
8樓2013-03-01 09:03:54
9樓2013-03-04 09:23:37
半角天空
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 95.5
- 散金: 5
- 帖子: 8
- 在線: 5.5小時(shí)
- 蟲號: 3927431
- 注冊: 2015-06-16
- 專業(yè): 膜生物化學(xué)與膜生物物理學(xué)
10樓2015-12-22 13:27:14
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 yuanalice 的主題更新
| 10 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 325求調(diào)劑 +5 | 李嘉圖·S·路 2026-03-23 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 349求調(diào)劑 +4 | 李木子啊哈哈 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +5 | lin0039 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 329求調(diào)劑 +5 | 1() 2026-03-22 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 085701環(huán)境工程，267求調(diào)劑 +4 | minht 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
[材料工程] 一志愿C9材料與化工專業(yè)總分300求調(diào)劑 +5 | 曼111 2026-03-24 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑 +3 | 璞玉~~ 2026-03-25 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 網(wǎng)絡(luò)空間安全0839招調(diào)劑 +4 | w320357296 2026-03-25 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)求調(diào)劑 +6 | 奶油草莓. 2026-03-22 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 材料學(xué)求調(diào)劑 +6 | Stella_Yao 2026-03-20 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 材料專碩找調(diào)劑 +5 | 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +6 | 研研，接電話 2026-03-24 | 7/350 |
|
|
|
[考研]
 材料考研調(diào)劑生
+3
|
黃粱一夢千年 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 344求調(diào)劑 +3 | desto 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿北京化工大學(xué) 070300 學(xué)碩 336分 求調(diào)劑 +7 | vv迷 2026-03-22 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 280分求調(diào)劑 一志愿085802 +4 | PUMPT 2026-03-22 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 298求調(diào)劑一志愿211 +3 | 上岸6666@ 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿北京化工大學(xué)070300 學(xué)碩336求調(diào)劑 +5 | vv迷 2026-03-21 | 8/400 |
|
|
|
[考研]
一志愿東華大學(xué)控制學(xué)碩320求調(diào)劑
+3
|
Grand777 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)297求調(diào)劑 +3 | Daisy☆ 2026-03-20 | 3/150 |
|