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380218013金蟲 (小有名氣)
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[求助]
苯酚氯仿異戊醇提取質(zhì)粒DNA 已有1人參與
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| 請問，用苯酚氯仿異戊醇方法提取質(zhì)粒DNA。沒有異戊醇了，可以用異丙醇代替嗎，為什么？ |
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【答案】應(yīng)助回帖
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不可替代，因為異丙醇溶于水，異戊醇微溶于水。原理：異戊醇的添加，其作用主要減少蛋白質(zhì)變性操作過程中產(chǎn)生的氣泡。異戊醇可以降低表面張力，從而減少氣泡產(chǎn)生。另外，異戊醇有助于分相，使離心后的上層含DNA的水相、中間的變性蛋白相及下層有機(jī)溶劑相維持穩(wěn)定，方便了水相的回收。其實，抽提質(zhì)粒時，可以省掉加苯酚氯仿異戊醇這一步，對后面抽提質(zhì)粒檢驗，酶切，PCR，沒有多大影響。 希望對你有幫助。 |
2樓2014-03-24 15:30:28
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