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380218013金蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
苯酚氯仿異戊醇提取質(zhì)粒DNA 已有1人參與
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| 請(qǐng)問(wèn),用苯酚氯仿異戊醇方法提取質(zhì)粒DNA。沒(méi)有異戊醇了,可以用異丙醇代替嗎,為什么? |

新蟲(chóng) (小有名氣)
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不可替代,因?yàn)楫惐既苡谒愇齑嘉⑷苡谒。原理:異戊醇的添加,其作用主要減少蛋白質(zhì)變性操作過(guò)程中產(chǎn)生的氣泡。異戊醇可以降低表面張力,從而減少氣泡產(chǎn)生。另外,異戊醇有助于分相,使離心后的上層含DNA的水相、中間的變性蛋白相及下層有機(jī)溶劑相維持穩(wěn)定,方便了水相的回收。其實(shí),抽提質(zhì)粒時(shí),可以省掉加苯酚氯仿異戊醇這一步,對(duì)后面抽提質(zhì)粒檢驗(yàn),酶切,PCR,沒(méi)有多大影響。 希望對(duì)你有幫助。 |
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