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鬼羽帝魂木蟲 (著名寫手)
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[求助]
求助:酶切的疑惑 已有3人參與
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最近做酶切,老是切不好,求幫助。 (1)回收不到東西:圖1是回收之前的帶。圖2是回收之后的帶,已經(jīng)彌散。 (2)做轉(zhuǎn)化鑒定,發(fā)現(xiàn)原來質(zhì)粒未酶切完全。但是回收后的條帶有稍微的彌散,這是什么原因?如圖3. (3)圖4中圓圈指示的區(qū)域是什么?是彌散的還是。。。。?? 望解答。急求。 圖1 圖2 圖3 圖4 |
木蟲 (著名寫手)
銀蟲 (小有名氣)
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1. 回收不到東西: 看看你的TAE的pH值是否正確,我們實驗室曾經(jīng)有一次TAE 的PH值不正確導(dǎo)致回收不了DNA。另外你膠回收的洗脫液用的是什么,是水么?洗脫液的PH好像要在8左右,保持堿性,要不然洗脫不下來。 2. 未酶切完全,回收回來的可能就有質(zhì)粒,你那彌散可能就是質(zhì)粒。 3. 你圈的東西是不是因為跑膠的問題導(dǎo)致的呢,看你膠配的不是很好,另外,給個建議,不要用這么大的孔來跑,我覺得這樣會導(dǎo)致彌散嚴重,建議用正常的膠回收孔來跑(個人建議)。 希望對你有幫助。 |
木蟲 (著名寫手)
銀蟲 (小有名氣)
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