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ming0515鐵桿木蟲 (正式寫手)
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[求助]
PCR條件,請指導(dǎo)。 已有4人參與
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大家好, 最近進(jìn)行PCR擴(kuò)增,產(chǎn)物大小理論值為1580bp,用到的PCR條件為下列兩種: ①94℃ 5min;94℃ 30s,55℃ 30s,72℃ 1.5min;72℃ 10min; ②94℃ 5min;94℃ 30s,55℃ 1.5min,72℃ 30s;72℃ 10min; 讓人糾結(jié)的是用①正常的PCR條件嘗試各種方法就是P不出條帶(也做過梯度PCR45-57℃), 但是因為一個意外PCR條件采用了②條件,擴(kuò)增出了正確的產(chǎn)物。 對此想請教為什么錯誤的條件②可以P出正確產(chǎn)物,且以后的驗證實驗是不是也需要采取②條件。 謝謝! |

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