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ming0515鐵桿木蟲 (正式寫手)
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[求助]
PCR條件，請指導(dǎo)。 已有4人參與
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大家好， 最近進(jìn)行PCR擴(kuò)增，產(chǎn)物大小理論值為1580bp，用到的PCR條件為下列兩種： ①94℃ 5min；94℃ 30s，55℃ 30s，72℃ 1.5min；72℃ 10min； ②94℃ 5min；94℃ 30s，55℃ 1.5min，72℃ 30s；72℃ 10min； 讓人糾結(jié)的是用①正常的PCR條件嘗試各種方法就是P不出條帶（也做過梯度PCR45-57℃）， 但是因?yàn)橐粋�意外PCR條件采用了②條件，擴(kuò)增出了正確的產(chǎn)物。 對此想請教為什么錯誤的條件②可以P出正確產(chǎn)物，且以后的驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)是不是也需要采取②條件。 謝謝！ |
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pennchem
專家顧問 (正式寫手)
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8樓2014-04-06 22:02:09
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至尊木蟲 (著名寫手)
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ming0515
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4樓2014-04-06 12:22:43
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