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蛋白復(fù)性后濃度降低了,不知是什么原因 已有1人參與
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今天蛋白復(fù)性終于結(jié)束了,但是出現(xiàn)了一些問題 之前用尿素將包涵體溶解,過柱子純化,跑了PGAE,看到目的帶很濃。然后逐步降低尿素濃度來復(fù)性,6M尿素(24h)----4M尿素(12h)----2M尿素(12h)----0.5M尿素(12h)--------PBS(12h). 復(fù)性前體積是3.5ML,復(fù)性完后體積,就只有1.2ML左右了,復(fù)性前濃度是400ug/ml,復(fù)性完后是14ug/ml, 而且在復(fù)性過程中也沒有沉淀產(chǎn)生。這是怎么搞的啊,復(fù)性過程中該注意什么地方。孔鲋笆遣楹觅Y料的,應(yīng)該注意的地方也覺得是注意到了,還有其他一些情況嗎?求高手解答一下! |
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