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蛋白復(fù)性后濃度降低了，不知是什么原因 已有1人參與
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今天蛋白復(fù)性終于結(jié)束了，但是出現(xiàn)了一些問(wèn)題 之前用尿素將包涵體溶解，過(guò)柱子純化，跑了PGAE，看到目的帶很濃。然后逐步降低尿素濃度來(lái)復(fù)性，6M尿素（24h）----4M尿素（12h）----2M尿素（12h）----0.5M尿素（12h）--------PBS（12h）. 復(fù)性前體積是3.5ML，復(fù)性完后體積，就只有1.2ML左右了，復(fù)性前濃度是400ug/ml，復(fù)性完后是14ug/ml， 而且在復(fù)性過(guò)程中也沒(méi)有沉淀產(chǎn)生。這是怎么搞的啊，復(fù)性過(guò)程中該注意什么地方��？做之前是查好資料的，應(yīng)該注意的地方也覺(jué)得是注意到了，還有其他一些情況嗎？求高手解答一下！ |
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pennchem
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