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majichui新蟲 (初入文壇)
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[求助]
關(guān)于質(zhì)粒電泳smear的問題 已有1人參與
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構(gòu)建的克隆菌,用QIAGEN Hispeed Plasmid midi kit(大約兩年前購買的)抽提,抽提后取10ug,用Xbal1 酶切過夜,電泳鑒定。質(zhì)粒為PUC19插入1000bp片段,用1%瓊脂糖膠電泳,上樣量為100ng,TAE做緩沖液100V電泳70分鐘,Marker從大到小是4500、3000、2250、1500、1000。染色用的是SYBR-GREEN染料,成像時(shí)用紫外激發(fā)(沒有400nm的條件)。 泳道1和3是抽提的質(zhì)粒;2和4是單酶切后,用天根試劑盒(DNA純化回收試劑盒)純化后產(chǎn)物。請(qǐng)問條帶模糊的原因? |
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