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利用考馬斯亮藍(lán)G-250測定繪制牛血清蛋白的標(biāo)準(zhǔn)曲線 已有1人參與
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查了很多資料，基本上說的都是取100mg考馬斯亮藍(lán)G-250溶于50ml95%乙醇中，再加100ml85%的磷酸，用蒸餾水稀釋到1L。我覺得實驗需要的量不是很多就用100ml容量瓶配制了，所有物質(zhì)的量都按比例縮小10倍。 一系列標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：用BSA配制1mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)溶液；取七個25ml的容量瓶，分別標(biāo)號為1、2、3、4、5、6、7，分別加入樣品、試劑，即用1.0mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)溶液給各試管分別加入0、2、4、8、12、16、20ml，然后向各容量瓶中分別加入5.0ml考馬斯亮藍(lán)G-250試劑，并立即搖勻，最后用蒸餾水補(bǔ)充到25ml。 用第5號容量瓶里的標(biāo)準(zhǔn)溶液分別在580nm、585nm、590nm、595nm、600nm、605nm、610nm測定吸光度，得出最大吸收波長為595nm，以1號為對照，測出的吸光度如下：0、0.105、0.134、0.142、0.146、0.161、0.137。很失敗誒，做了兩次都差不多的數(shù)據(jù)，不知道為什么。 還有我沒有過濾過考馬斯亮藍(lán)溶液，是藍(lán)色的。 另外牛血清蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液配制的時候，有產(chǎn)生泡沫一樣的東西，怎么定容啊？ 新蟲求蟲哥哥蟲姐姐們支招  （窮蟲蟲現(xiàn)在沒金幣可撒哦，見諒么么噠 ） |
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