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chrisdonkey金蟲 (小有名氣)
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[求助]
反相HPLC柱壓過高 已有11人參與
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柱子是月旭的C18柱，流動(dòng)相為乙腈：水=38：62，pH 2.2。 去年這個(gè)時(shí)候開始用的，當(dāng)時(shí)流速1 mL/min 時(shí)，柱壓大概7、8 MPa，室溫。 后來有一陣子沒用，今年3月份的時(shí)候再用，流速1 mL/min 時(shí)柱壓達(dá)到11 MPa，但也可以用，柱溫升高到35℃，壓力可以控制在10 MPa以下。 前兩天再用的時(shí)候，流速0.6 mL/min時(shí)柱壓達(dá)到10.6MPa，就沒敢再增加流速，換了90%的乙腈沖洗，流速0.6 mL/min時(shí)柱壓為3 MPa，與以前的情況相似，再換回流動(dòng)相沖洗，柱壓又升高，流速0.4 mL/min時(shí)柱壓為7.6 MPa。 求問可能是哪方面的原因呢？如果是柱子有問題，可是用90%乙腈沖洗的時(shí)候就正常。我也懷疑是不是流動(dòng)相的問題，所以又進(jìn)行了一次抽濾脫氣處理，換回去再?zèng)_洗就是流速0.4 mL/min柱壓7.6 MPa的情況，沒敢再升流速，停止之后用90%沖洗了近一個(gè)小時(shí)，就關(guān)機(jī)把柱子換下來了。 說明一下，去年用含鹽的流動(dòng)相測(cè)過別的東西，但是有用50%的甲醇過渡，而且后來再使用乙腈水的流動(dòng)相時(shí)也沒有什么問題，柱壓只比最開始高一點(diǎn)點(diǎn)。柱子不用的時(shí)候是保存在90%的乙腈里。 求各位大俠支招啊，我沒有系統(tǒng)地學(xué)習(xí)過，現(xiàn)在是兩眼一抹黑  |
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wskisaac
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【答案】應(yīng)助回帖
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suruiqin: 金幣+2, 感謝應(yīng)助，歡迎常來分析版交流~ 2014-05-06 10:50:36
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首先確定是柱子問題還是機(jī)器問題。 換一個(gè)其他柱子看看壓力是否正常，如果正常，那就是你柱子的問題。柱子壓力高，很可能是堵了。因?yàn)榧円译鎵毫艿停乱稽c(diǎn)的話，看不出來的。有可能是鹽堵或者其他東西堵了。 有預(yù)柱就換預(yù)柱看看。 如果鹽堵，考慮95%水 5%乙腈洗過夜~ 高濃度有機(jī)溶液洗不出鹽的。 如果不行，甚至可以考慮反方向洗，把柱子反著接洗，這樣有可能把柱頭部分臟東西洗出來。 好運(yùn)~ |
10樓2014-05-05 10:38:28
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