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chrisdonkey金蟲 (小有名氣)
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反相HPLC柱壓過高 已有11人參與
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柱子是月旭的C18柱，流動相為乙腈：水=38：62，pH 2.2。 去年這個時候開始用的，當(dāng)時流速1 mL/min 時，柱壓大概7、8 MPa，室溫。 后來有一陣子沒用，今年3月份的時候再用，流速1 mL/min 時柱壓達(dá)到11 MPa，但也可以用，柱溫升高到35℃，壓力可以控制在10 MPa以下。 前兩天再用的時候，流速0.6 mL/min時柱壓達(dá)到10.6MPa，就沒敢再增加流速，換了90%的乙腈沖洗，流速0.6 mL/min時柱壓為3 MPa，與以前的情況相似，再換回流動相沖洗，柱壓又升高，流速0.4 mL/min時柱壓為7.6 MPa。 求問可能是哪方面的原因呢？如果是柱子有問題，可是用90%乙腈沖洗的時候就正常。我也懷疑是不是流動相的問題，所以又進(jìn)行了一次抽濾脫氣處理，換回去再沖洗就是流速0.4 mL/min柱壓7.6 MPa的情況，沒敢再升流速，停止之后用90%沖洗了近一個小時，就關(guān)機(jī)把柱子換下來了。 說明一下，去年用含鹽的流動相測過別的東西，但是有用50%的甲醇過渡，而且后來再使用乙腈水的流動相時也沒有什么問題，柱壓只比最開始高一點(diǎn)點(diǎn)。柱子不用的時候是保存在90%的乙腈里。 求各位大俠支招啊，我沒有系統(tǒng)地學(xué)習(xí)過，現(xiàn)在是兩眼一抹黑  |
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