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18252091017新蟲 (初入文壇)
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[求助]
目的條帶P不出來！ 已有2人參與
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本人最近一直在提RNA,逆轉(zhuǎn)錄，PCR，可是總是P不出來我的目的條帶，換了兩次引物（第一次從一篇中文文獻(xiàn)中查到的，第二次從一篇英文文獻(xiàn)中查到的），結(jié)果都P不出來。我拿我逆轉(zhuǎn)錄出來的cDNA去p別人的引物和內(nèi)參，都能P出來，可P我自己的引物總是P不出來。請問各位， 1、是我引物的問題嗎？可是換了兩次了，還是不行。 2、我引物稀釋沒有在超凈臺里做，打開蓋子之前先3500轉(zhuǎn)離心5分鐘，再用nuclease-free water稀釋，這一步應(yīng)該沒問題吧？因為我也是同樣方法稀釋的內(nèi)參，結(jié)果內(nèi)參p出來了。 3、倘若是我引物問題，請問各位選取引物時是自己設(shè)計？還是文獻(xiàn)中查找？ 求各位大俠指點，謝謝各位了！ 0423 21號cDNA PCR vegf---RNA-_副本.jpg 0423 21號cDNA PCR vegf---RNA-.JPG |
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gyesang
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