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liangte0705金蟲 (小有名氣)
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[求助]
片段連接到載體后，總在酶切位點處發(fā)生缺失 已有3人參與
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| 各位同學(xué)，我最近遇到了一個難題。我的一個2900bp大小的片段，通過XhoⅠ和EcoRⅠ兩個酶切位點酶切后，連到POK-12載體上，通過pcr鑒定，片段連入了，但酶切鑒定失敗，測序后發(fā)現(xiàn)從XhoⅠ開始缺失300多bp堿基。我懷疑是片段和宿主菌發(fā)生了重組，因此換了許多感受態(tài)，例如DH5α，JM109，HB101,但仍然出現(xiàn)上述問題。已經(jīng)一個多月了，仍然沒有解決，請各位同學(xué)幫幫忙，看看是不是有什么方法能夠解決，多謝大家了。 |
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2樓2014-05-09 20:19:18
Neo2000
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3樓2014-05-10 07:30:30
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4樓2014-05-10 07:31:34
panda73
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5樓2014-05-10 10:28:20
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6樓2014-05-10 13:49:26
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