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高通量測序中PCR擴(kuò)增偏向性問題 已有1人參與
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誰能給一個好的詳細(xì)的說明 最好有相關(guān)文獻(xiàn) |
miRNA測序數(shù)據(jù)分析 |
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曾經(jīng)在測序公司工作過,現(xiàn)在不做測序很久了。無法給你相關(guān)文獻(xiàn)。說說我對這個問題的理解吧。 無論是一代測序還是二代測序,都是對一群DNA分子的測序,就是說要經(jīng)過PCR。據(jù)說三代測序可以實現(xiàn)單分子測序。 二代測序中,需要制備測序文庫,在文庫制備或者測序過程中就會出現(xiàn)提主所說的PCR偏向性問題了。在同一體系中,高GC、有二級結(jié)構(gòu)的片段顯然被擴(kuò)增的機(jī)會相對少。在測序結(jié)果中,某一片段的重復(fù)數(shù),究竟是樣品本身真實情況還是由于PCR帶來的,就會出現(xiàn)偏差。從而對測序結(jié)果產(chǎn)生影響。 |
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