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呀薯?xiàng)l金蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
目的基因的表達(dá) 已有1人參與
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我需要做目的基因的表達(dá)，現(xiàn)在已經(jīng)克隆完成，回收質(zhì)粒后，總是感覺(jué)質(zhì)粒的濃度不夠高，所以在雙酶切后（由于沒(méi)有通用緩沖液，所以是在分別酶切），感覺(jué)產(chǎn)物濃度更低，有時(shí)電泳條帶都看不清。 那我可以直接用克隆回收后的質(zhì)粒作為PCR模板，經(jīng)過(guò)擴(kuò)增后，電泳回收產(chǎn)物，再將這個(gè)產(chǎn)物作為底物來(lái)進(jìn)行雙酶切操作以及后續(xù)與表達(dá)載體的連接嗎？ |
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呀薯?xiàng)l
金蟲(chóng) (小有名氣)
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6樓2014-05-24 09:54:46
for5
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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呀薯?xiàng)l: 金幣+2, ★★★很有幫助 2014-05-23 11:54:18
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呀薯?xiàng)l: 金幣+2, ★★★很有幫助 2014-05-23 11:54:18
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那就質(zhì)粒多提一點(diǎn)，膠回收好好做，回收率會(huì)高不少。濃度低點(diǎn)也可以做連接，只要基因和載體切干凈就好，連接就是概率問(wèn)題。 [ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ] |
2樓2014-05-22 16:22:13
呀薯?xiàng)l
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3樓2014-05-22 18:10:53
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4樓2014-05-22 18:13:25
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