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藍默兒金蟲 (小有名氣)
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[求助]
ELISA空白值過高 已有2人參與
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| 進行的是夾心ELISA，用多抗做包被抗體，抗原為原核表達的蛋白，之后加酶標單抗�？瞻讓φ湛资遣患涌乖拥氖荘BS，其它相同。 |
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antibodyknow
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【答案】應助回帖
★ ★ ★
感謝參與，應助指數(shù) +1
藍默兒: 金幣+3, ★有幫助 2014-05-23 09:43:10
感謝參與，應助指數(shù) +1
藍默兒: 金幣+3, ★有幫助 2014-05-23 09:43:10
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兩種可能： 1.你的包被用的多抗與酶標單抗之間有交叉反應。檢查一下你的多抗是哪種多抗：鼠多抗，兔多抗還是羊多抗？你的酶標單抗與多抗最好是同一種來源。多抗做包被抗體本身就不是一個好選擇，容易出現(xiàn)交叉反應，導致背景高。 2.你的整個ELISA過程是否封閉、洗滌充分。建議在所用的封閉和洗滌buffer中加Tween20至0.1%，減少非特異性結合。 3.建議做一個完全空白對照，即包被時用PBS，封閉環(huán)節(jié)正常，樣品用PBS，然后正常加酶標二抗�？梢猿醪脚袛嗄愕腅LISA系統(tǒng)是否正常，進而可以判斷出你的多抗和二抗間是否有交叉反應。 祝好運！ |
2樓2014-05-22 22:37:00
藍默兒
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3樓2014-05-23 09:44:53
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6樓2019-09-20 15:08:24
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