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陶盛昌木蟲 (正式寫手)
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[求助]
DEAE纖維柱斷層求助 已有2人參與
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| 求助,各位蟲友,我的柱子裝好后,加恒流泵后經(jīng)常斷層,不知何因?填料是DEAE-52,柱子是中壓層析柱,200g的填料溶于400ml的水,填料上柱前,放入抽濾瓶里真空脫過起泡,上柱沉降后沒什么問題,但恒流泵平衡后,會出現(xiàn)斷層的現(xiàn)象,各位知道為什么嗎,給些建議,求教 |
多糖項(xiàng)目 |

木蟲 (正式寫手)

木蟲 (正式寫手)
| DEAE-52屬于陰離子交換柱,一般上柱前先得預(yù)處理,一般是保存在一定濃度的乙醇中,先得用水充分溶脹(過夜)并除去其中的乙醇和不溶物,建議過夜后用水多洗幾次。然后用堿-酸-堿處理,并用蒸餾水洗至中性即可上柱。不知道樓主這些做沒做,如果做了,還斷層請問你得柱子什么規(guī)格,纖維素柱一般用短粗的,平衡流速一般1ml/min,這個平衡時的流速一定要大于你得上樣后的洗脫流速,不然可能會斷層或者降低柱效,造成你試驗(yàn)的重現(xiàn)性差,請樓主參考 |
木蟲 (正式寫手)

金蟲 (職業(yè)作家)
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