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demonsboy金蟲 (小有名氣)
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求助酶聯(lián)免疫的問題 已有5人參與
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| 本人在做一種雙抗體夾心法試劑盒，評估一對抗體時，采用抗體直接包板捕捉抗原顯示，兩種配對抗體可用，而借助親和素包板，吸附生物素標記抗體，爾后再檢測抗原時，這對抗體檢測臨床抗原效果卻特別不理想，請問在這種情況下，調(diào)節(jié)反應緩沖液，可以解決問題嗎，還是這對抗體本身不適合于親和素間接包板，求大俠支招 |
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demonsboy
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4樓2014-05-29 16:31:08
【答案】應助回帖
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既然直接包被抗體測定抗原的效果還可以的話，為什么還要加上生物素-鏈酶親和素的系統(tǒng)呢？是為了放大信號，增加靈敏度？ 增加了一個系統(tǒng)，就多了一分風險，生物素標記抗體，如果標記處理不好的話，就影響到整個反應體系了，所以能不用就不用吧。而且如果是為了增加靈敏度，還可以生物素-親和素系統(tǒng)放在后面，即生物素標記原來的酶標抗體，鏈酶親和素標記HRP。 如果一定要用生物素的話，建議選擇側(cè)鏈比較長的生物素，可以降低空間位阻對抗原抗體反應的影響。而且注意生物素標記抗體的方法不能有問題，最好是買生物素標記的試劑盒來標記生物素。 另外，你這是雙抗體夾心法檢測抗原，如果你的抗體都是鼠單抗的話，你要避免反應體系里的異嗜性干擾，即RF因子和HAMA對檢測的影響，這種影響是會造成假陽性的。 |
5樓2014-06-06 20:42:14
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