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藍(lán)默兒金蟲 (小有名氣)
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[求助]
ELISA實(shí)驗(yàn)中,抗原和抗體的稀釋液?jiǎn)栴} 已有3人參與
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| 想問下:進(jìn)行抗原、抗體稀釋時(shí),是用PBS、PBST、還是封閉液(5%脫脂乳)進(jìn)行?謝謝 |

鐵桿木蟲 (著名寫手)
鐵桿木蟲 (著名寫手)
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其實(shí),用PBS、PBST,甚至用封閉液(5%的脫脂奶粉)來稀釋抗原抗體,都可以。 PBS,就是為抗原抗體反應(yīng)提供合適的緩沖體系。至于加了吐溫的PBS,這個(gè)我也有點(diǎn)費(fèi)解,我的理解是:這可能是為了保證反應(yīng)的特異性,避免抗原抗體與微孔板的非特異性結(jié)合,當(dāng)然這只是本人猜想,我還沒怎么驗(yàn)證過。不過確實(shí)是這兩種液體都可以用來稀釋抗原抗體。 然后,封閉液(5%脫脂奶粉),我想封閉液的緩沖體系也是pH7.2-7.8的PBS或者Tris-HCl,這樣的緩沖體系也可以滿足抗原抗體的反應(yīng)了。而脫脂奶粉,或者其他網(wǎng)友說的BSA,這些可以提高抗原抗體的穩(wěn)定性,特別是低濃度的抗原抗體。 所以,如果樓主每次實(shí)驗(yàn)的抗原抗體都是現(xiàn)配現(xiàn)用的話,那只要提供了合適的pH環(huán)境,哪種緩沖液都可以,但是如果需要長(zhǎng)期保存的話,還是要用帶BSA或者能保證抗原抗體穩(wěn)定性的液體來稀釋! |
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