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藍(lán)默兒金蟲 (小有名氣)
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[求助]
ELISA實(shí)驗(yàn)中，抗原和抗體的稀釋液?jiǎn)栴} 已有3人參與
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| 想問(wèn)下：進(jìn)行抗原、抗體稀釋時(shí)，是用PBS、PBST、還是封閉液（5%脫脂乳）進(jìn)行？謝謝 |
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逍瀟
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2樓2014-06-10 15:41:43
小周
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3樓2014-06-10 22:04:02
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
藍(lán)默兒: 金幣+2, ★有幫助 2014-06-11 08:55:28
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其實(shí)，用PBS、PBST，甚至用封閉液（5%的脫脂奶粉）來(lái)稀釋抗原抗體，都可以。 PBS，就是為抗原抗體反應(yīng)提供合適的緩沖體系。至于加了吐溫的PBS，這個(gè)我也有點(diǎn)費(fèi)解，我的理解是：這可能是為了保證反應(yīng)的特異性，避免抗原抗體與微孔板的非特異性結(jié)合，當(dāng)然這只是本人猜想，我還沒(méi)怎么驗(yàn)證過(guò)。不過(guò)確實(shí)是這兩種液體都可以用來(lái)稀釋抗原抗體。 然后，封閉液（5%脫脂奶粉），我想封閉液的緩沖體系也是pH7.2-7.8的PBS或者Tris-HCl，這樣的緩沖體系也可以滿足抗原抗體的反應(yīng)了。而脫脂奶粉，或者其他網(wǎng)友說(shuō)的BSA，這些可以提高抗原抗體的穩(wěn)定性，特別是低濃度的抗原抗體。 所以，如果樓主每次實(shí)驗(yàn)的抗原抗體都是現(xiàn)配現(xiàn)用的話，那只要提供了合適的pH環(huán)境，哪種緩沖液都可以，但是如果需要長(zhǎng)期保存的話，還是要用帶BSA或者能保證抗原抗體穩(wěn)定性的液體來(lái)稀釋！ |
4樓2014-06-10 22:16:05
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