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沐小白新蟲 (初入文壇)
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[求助]
急！關(guān)于細(xì)胞試驗的幾個疑問？ 已有3人參與
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剛剛接觸細(xì)胞試驗，有幾個疑問麻煩各位有經(jīng)驗的前輩指教： 1.一般試驗細(xì)胞的最佳時期為對數(shù)生長期，在做MTT試驗時，選取處于對數(shù)生長期的細(xì)胞計數(shù)后以一定細(xì)胞密度接種鋪板，一般是經(jīng)過24小時的培養(yǎng)后做給藥處理，我的疑問是：已經(jīng)經(jīng)過一天培養(yǎng)的細(xì)胞是否還是處于最佳試驗周期的細(xì)胞呢？這時候細(xì)胞的數(shù)量較接種之前的技術(shù)也發(fā)生了變化，這對我測定細(xì)胞存活率等是否會有影響？ 2.目前在做的是HepG2的一個試驗，在鋪板后96孔板中各孔觀察到的細(xì)胞形態(tài)多為圓形，與在培養(yǎng)皿和瓶中生長時的梭形細(xì)胞有所不同，且視野內(nèi)觀察到的細(xì)胞非常少（接種的計數(shù)密度為10000個/孔），這些情況是否正常？ 很是著急~~~本人新手，金幣不多，懇請各位前輩指導(dǎo)一下，真心謝過~~~~  |
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yipan 
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2樓2014-06-26 13:20:53
| 頂一下~~~ |
3樓2014-06-26 20:16:04
4樓2014-06-27 10:55:27
我聽五月天
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
沐小白: 金幣+5, ★有幫助 2014-07-18 09:38:33
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1.最好不要讓瓶子里長滿了的細(xì)胞再擠一天，不用的話及時傳代或者凍存。擠了一天肯定影響了狀態(tài)，不過要求不是那么嚴(yán)格或者實驗的目的不要求精確數(shù)據(jù)的話可以用。 2.這個肝癌細(xì)胞應(yīng)該比較好養(yǎng)，同學(xué)用小牛血清都可以養(yǎng)，應(yīng)該不是圓形，圓形說明狀態(tài)不對，實驗應(yīng)該不能用了。10000/孔可以做24-48小時的，不過如果要做72小時或>72小時的估計這個數(shù)量有點兒大。 |
5樓2014-06-27 15:18:08
沐小白
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6樓2014-07-07 09:05:34
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7樓2014-07-09 18:04:16
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