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沐小白新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
急！關(guān)于細(xì)胞試驗(yàn)的幾個(gè)疑問(wèn)？ 已有3人參與
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剛剛接觸細(xì)胞試驗(yàn)，有幾個(gè)疑問(wèn)麻煩各位有經(jīng)驗(yàn)的前輩指教： 1.一般試驗(yàn)細(xì)胞的最佳時(shí)期為對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，在做MTT試驗(yàn)時(shí)，選取處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞計(jì)數(shù)后以一定細(xì)胞密度接種鋪板，一般是經(jīng)過(guò)24小時(shí)的培養(yǎng)后做給藥處理，我的疑問(wèn)是：已經(jīng)經(jīng)過(guò)一天培養(yǎng)的細(xì)胞是否還是處于最佳試驗(yàn)周期的細(xì)胞呢？這時(shí)候細(xì)胞的數(shù)量較接種之前的技術(shù)也發(fā)生了變化，這對(duì)我測(cè)定細(xì)胞存活率等是否會(huì)有影響？ 2.目前在做的是HepG2的一個(gè)試驗(yàn)，在鋪板后96孔板中各孔觀察到的細(xì)胞形態(tài)多為圓形，與在培養(yǎng)皿和瓶中生長(zhǎng)時(shí)的梭形細(xì)胞有所不同，且視野內(nèi)觀察到的細(xì)胞非常少（接種的計(jì)數(shù)密度為10000個(gè)/孔），這些情況是否正常？ 很是著急~~~本人新手，金幣不多，懇請(qǐng)各位前輩指導(dǎo)一下，真心謝過(guò)~~~~  |
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
沐小白: 金幣+5, ★有幫助 2014-07-18 09:38:33
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沐小白: 金幣+5, ★有幫助 2014-07-18 09:38:33
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1.最好不要讓瓶子里長(zhǎng)滿了的細(xì)胞再擠一天，不用的話及時(shí)傳代或者凍存。擠了一天肯定影響了狀態(tài)，不過(guò)要求不是那么嚴(yán)格或者實(shí)驗(yàn)的目的不要求精確數(shù)據(jù)的話可以用。 2.這個(gè)肝癌細(xì)胞應(yīng)該比較好養(yǎng)，同學(xué)用小牛血清都可以養(yǎng)，應(yīng)該不是圓形，圓形說(shuō)明狀態(tài)不對(duì)，實(shí)驗(yàn)應(yīng)該不能用了。10000/孔可以做24-48小時(shí)的，不過(guò)如果要做72小時(shí)或>72小時(shí)的估計(jì)這個(gè)數(shù)量有點(diǎn)兒大。 |
5樓2014-06-27 15:18:08
沐小白
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6樓2014-07-07 09:05:34
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