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wlc0206新蟲 (初入文壇)
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[求助]
基因測序后blast不是100%還能繼續(xù)表達(dá)蛋白嗎? 已有2人參與
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各位大神,如題。最近在做原核表達(dá)載體的構(gòu)建,菌落pcr后送去測序了,但測回來的序列只有99%的吻合度,有一個堿基發(fā)生了錯義突變,最后翻譯過來有一個氨基酸發(fā)生了突變,我還能繼續(xù)做下去嗎?有什么軟件可以分析氨基酸序列的,我后面主要是想得到蛋白然后制備多克隆抗體。謝謝![]() |
至尊木蟲 (文壇精英)

木蟲 (正式寫手)
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1.你是拿到的重組原核表達(dá)質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化子送去測序的嗎?你擴(kuò)增基因用的模板是哪個材料?基因組,載體?如果是以載體為模板以前測過序嗎? 2.你的整個基因序列只有這一個突變位點(diǎn),而且就這一個就改變氨基酸序列了嗎?如果是這樣那很有可能就是你PCR過程中引入的。 3.只要確定是PCR引入的而不是模板自身的問題,還是從新來吧,用這一批蛋白萬一后面的抗體制備不順利的話就說不清楚了。 |

鐵蟲 (初入文壇)
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