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wlc0206新蟲 (初入文壇)
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基因測(cè)序后blast不是100%還能繼續(xù)表達(dá)蛋白嗎？ 已有2人參與
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各位大神，如題。最近在做原核表達(dá)載體的構(gòu)建，菌落pcr后送去測(cè)序了，但測(cè)回來的序列只有99%的吻合度，有一個(gè)堿基發(fā)生了錯(cuò)義突變，最后翻譯過來有一個(gè)氨基酸發(fā)生了突變，我還能繼續(xù)做下去嗎？有什么軟件可以分析氨基酸序列的，我后面主要是想得到蛋白然后制備多克隆抗體。謝謝 |
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yuguiyan
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
wlc0206(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-07-27 09:37:23
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1.你是拿到的重組原核表達(dá)質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化子送去測(cè)序的嗎？你擴(kuò)增基因用的模板是哪個(gè)材料？基因組，載體？如果是以載體為模板以前測(cè)過序嗎？ 2.你的整個(gè)基因序列只有這一個(gè)突變位點(diǎn)，而且就這一個(gè)就改變氨基酸序列了嗎？如果是這樣那很有可能就是你PCR過程中引入的。 3.只要確定是PCR引入的而不是模板自身的問題，還是從新來吧，用這一批蛋白萬一后面的抗體制備不順利的話就說不清楚了。 |
4樓2014-07-27 03:58:45
楊仔
鐵蟲 (初入文壇)
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5樓2014-07-30 17:33:47
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