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wlc0206新蟲 (初入文壇)
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[求助]
基因測序后blast不是100%還能繼續(xù)表達蛋白嗎？ 已有2人參與
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各位大神，如題。最近在做原核表達載體的構(gòu)建，菌落pcr后送去測序了，但測回來的序列只有99%的吻合度，有一個堿基發(fā)生了錯義突變，最后翻譯過來有一個氨基酸發(fā)生了突變，我還能繼續(xù)做下去嗎？有什么軟件可以分析氨基酸序列的，我后面主要是想得到蛋白然后制備多克隆抗體。謝謝 |
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3樓2014-07-27 00:04:16
yuguiyan
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2樓2014-07-26 22:51:48
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
wlc0206(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵回帖交流 2014-07-27 09:37:23
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wlc0206(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵回帖交流 2014-07-27 09:37:23
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1.你是拿到的重組原核表達質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化子送去測序的嗎？你擴增基因用的模板是哪個材料？基因組，載體？如果是以載體為模板以前測過序嗎？ 2.你的整個基因序列只有這一個突變位點，而且就這一個就改變氨基酸序列了嗎？如果是這樣那很有可能就是你PCR過程中引入的。 3.只要確定是PCR引入的而不是模板自身的問題，還是從新來吧，用這一批蛋白萬一后面的抗體制備不順利的話就說不清楚了。 |
4樓2014-07-27 03:58:45
楊仔
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5樓2014-07-30 17:33:47
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