 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 4 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2826 | 回復(fù): 3 | ||
zisejiguan銅蟲(chóng) (小有名氣)
|
[求助]
流式細(xì)胞術(shù)，對(duì)照設(shè)置 已有2人參與
|
|
大神好。最近在做流式，由于是新手，好多東西不明白。我在檢測(cè)我做的穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系中細(xì)胞陽(yáng)性率有多少，也就是純不純。陰性對(duì)照怎么設(shè)啊，我用的是沒(méi)有轉(zhuǎn)入目的蛋白的細(xì)胞染的一抗和二抗，效果很不理想啊。不知道是不是對(duì)照設(shè)的有問(wèn)題 另附上實(shí)驗(yàn)方法，看看步驟是不是哪里需要改進(jìn)的。 1. 收集細(xì)胞，Staining Buffer清洗細(xì)胞，最后剩100μL，渦旋重選細(xì)胞 2. 加入100μL固定液(4%多聚甲醛)，室溫孵育20min 3. 加入500μL破膜液（0.1%皂素），300-400g，室溫離心5min，棄上清 4. 500μL破膜液重懸細(xì)胞 5. 300-400g，室溫離心5min，棄上清 6. 100μL破膜液重懸細(xì)胞，加入一抗，孵育1h 7. 加入500μL破膜液，300-400g，室溫離心5min，棄上清 8. 重復(fù)步驟7 9. 100μL破膜液重懸細(xì)胞，加入熒光偶聯(lián)抗體孵育30min 10. 加入500μL破膜液，300-400g，室溫離心5min，棄上清 11. 重復(fù)步驟10 12. 用適量流式染色Buffer（PBS）重懸，上流式細(xì)胞儀分析。 PS: Staining Buffer：1%BSA or 5%FBS的1×PBS Fix Buffer：4%多聚甲醛的1×PBS 0.22μm濾器過(guò)濾 一抗：1h 二抗：30min |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
070300化學(xué)求調(diào)劑
已經(jīng)有9人回復(fù)
-
085404 22408 315分
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
材料與化工272求調(diào)劑
已經(jīng)有22人回復(fù)
-
347求調(diào)劑
已經(jīng)有10人回復(fù)
-
354求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
一志愿華東理工大學(xué)，080500學(xué)碩，317分，求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
一志愿a區(qū)211，085601-307分求調(diào)劑
已經(jīng)有11人回復(fù)
-
284求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
求調(diào)劑：085600材料與化工，考材科基，總分319
已經(jīng)有18人回復(fù)
-
362求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光強(qiáng)度，不知道一些參數(shù)設(shè)置? 還請(qǐng)各位多多指導(dǎo)，很急，謝謝！
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 細(xì)胞藥理學(xué)的問(wèn)題請(qǐng)教藥理行家
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 甲基化酶切不完全，怎樣設(shè)置對(duì)照呢？
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 請(qǐng)做過(guò)活性氧檢測(cè)實(shí)驗(yàn)的戰(zhàn)友們前來(lái)指導(dǎo)，我打算采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)DCF
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 流式細(xì)胞分析分選術(shù)
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 求助CFSE標(biāo)記檢測(cè)細(xì)胞增殖
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 【求助/交流】流式 細(xì)胞數(shù)量問(wèn)題
已經(jīng)有6人回復(fù)
2樓2014-08-27 14:52:50
linshangyan
鐵蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 4 (幼兒園)
- 金幣: 1.3
- 散金: 64
- 紅花: 2
- 帖子: 192
- 在線(xiàn): 126.1小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 246063
- 注冊(cè): 2006-04-29
- 專(zhuān)業(yè): 藥物分析
3樓2014-08-27 17:47:24
4樓2014-08-28 09:06:02
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 zisejiguan 的主題更新
| 4 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 288求調(diào)劑 一志愿哈工大 材料與化工 +9 | 洛神哥哥 2026-03-31 | 9/450 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 294分080500材料科學(xué)與工程求調(diào)劑 +9 | 柳溪邊 2026-03-26 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 282求調(diào)劑 不挑專(zhuān)業(yè) 求收留 +3 | Yam. 2026-03-30 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 考研生物與醫(yī)藥調(diào)劑 +3 | 鐵憨憨123425 2026-03-31 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 吉大生物學(xué)326分求調(diào)劑 +3 | sunnyupup 2026-03-31 | 3/150 |
|
|
|
[考研]
 物理學(xué)調(diào)劑
+3
|
小羊36 2026-03-30 | 3/150 |
|
|
|
[有機(jī)交流]
 甲基亞磺磺酸鈉和甲基磺酸酯反應(yīng)機(jī)理
 10+3
|
kaobao456 2026-03-29 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求收留 +6 | 1943443204 2026-03-28 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿北京化工大學(xué)材料與化工（085600）296求調(diào)劑 +25 | 稻妻小編 2026-03-26 | 25/1250 |
|
|
|
[考研] 各位老師好，我的一志愿為北京科技大學(xué)085601材料專(zhuān)碩 +10 | Koxui 2026-03-28 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 322求調(diào)劑：一志愿湖南大學(xué) 材料與化工（085600），已過(guò)六級(jí)。 +9 | XX小鄧 2026-03-29 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 318一志愿吉林大學(xué)生物與醫(yī)藥 求調(diào)劑 +5 | 篤行致遠(yuǎn). 2026-03-28 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +4 | QiMing7 2026-03-25 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +10 | 15188958825 2026-03-25 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 085600，專(zhuān)業(yè)課化工原理，321分求調(diào)劑 +5 | 大饞小子 2026-03-28 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 305求調(diào)劑 +8 | RuiFairyrui 2026-03-28 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 材料277求調(diào)劑 +7 | min3 2026-03-24 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 藥學(xué)105500求調(diào)劑 +3 | Ssun。。 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 340求調(diào)劑 +5 | jhx777 2026-03-27 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 環(huán)境專(zhuān)碩324分求調(diào)劑推薦 +5 | 軒小寧—— 2026-03-26 | 5/250 |
|