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zj251989新蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
為何會(huì)有如此多的條帶？？？ 已有3人參與
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大家好，我最近正在做關(guān)于分子上的克隆，但是根據(jù)NCBI上設(shè)計(jì)的引物，因?yàn)楸磉_(dá)我要蛋白的基因有很多種，然后我就設(shè)計(jì)了兩對(duì)引物，老師給的菌沒(méi)有具體的種屬，然后提出基因組，PCR出如圖一樣的效果，我本身兩段目的片段是有1000bp左右，但是看著圖我凌亂了，不知道該怎么辦？求各位大神給給意見(jiàn)。。。。。。。 2000bp的marke 2000bp的marke |
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 核酸生物學(xué)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn) |
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【答案】應(yīng)助回帖
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zj251989(西門(mén)吹雪170代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-08-19 20:24:13
zj251989: 金幣+5, ★★★很有幫助 2014-08-20 11:01:29
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zj251989(西門(mén)吹雪170代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-08-19 20:24:13
zj251989: 金幣+5, ★★★很有幫助 2014-08-20 11:01:29
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個(gè)人看法： 圖1的第一泳道是有主帶的，1000bp左右。你可以適當(dāng)提高退火溫度，這樣可能會(huì)減少些雜帶（PCR有雜帶也是挺正常的）。 不知道你的下一步實(shí)驗(yàn)是什么，如果是做克隆的話，那就切膠回收，連上載體測(cè)序，就知道是不是你想要的序列了。 |
3樓2014-08-19 16:40:58
2樓2014-08-19 16:40:23
zj251989
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4樓2014-08-20 11:01:18
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5樓2014-08-20 11:04:43
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