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tuhua新蟲 (小有名氣)
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[求助]
擴增不出產(chǎn)物 已有5人參與
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本人剛合成的引物正在做梯度PCR，目的條帶為1650bp,公司合成的單子顯示的上游引物為58.3，下游為58.9。用普通的aq酶沒有擴增出來， 引物二聚體也沒有，所用的槍頭，管子都是剛滅菌的，cDNA沒有問題，在超凈工作臺上操作。體系是20ul ，具體如下， Taq酶 0.3ul， 10*Buffer 2 ul， dNTP 1ul， cDNA 0.5ul， Mgcl2 1.2ul (25mM) 上游引物0.5 下游引物0.5 ddH2O 14ul 95 5min 95 30s 54/64 50s 72 100s 28個循環(huán) 72 10min 請各位幫忙分析下，是什么原因呢 |
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2樓2014-08-23 07:41:38
3樓2014-08-25 22:27:06
鬼羽帝魂
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4樓2014-08-26 10:56:05
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5樓2014-08-27 14:18:36
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6樓2014-08-27 15:25:41
tuhua
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7樓2014-09-07 18:58:34
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