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wwwpengcs銅蟲 (初入文壇)
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[求助]
我的JM109-pKD46質(zhì)粒的電擊感受態(tài)轉(zhuǎn)化效率怎么一直都提不上去呢 已有3人參與
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| 大家好，我最近在做JM109菌株的敲除實(shí)驗(yàn)，JM109內(nèi)導(dǎo)入了一個pKD46質(zhì)粒，用10%的甘油洗了兩次。制作感受態(tài)的一些基本方面都注意到了，因?yàn)槲抑白隽撕芏嚯姄襞c熱擊的感受態(tài)，熱擊的感受態(tài)轉(zhuǎn)化效率一直都非常高。我檢測我的感受態(tài)的轉(zhuǎn)化率是直接導(dǎo)入了一個與pKD46（氨芐抗性）質(zhì)粒兼容的pET-30a(卡納抗性）質(zhì)粒，用雙抗板來檢測。但是每次導(dǎo)入pET-30a質(zhì)粒后，雙抗板上要么是沒有長出菌，要么是染了少許雜菌。pKD46質(zhì)粒的復(fù)制子是R101，pET-30a的復(fù)制子是pBR322。可以肯定的是，這兩個質(zhì)粒是完全可以兼容的。做了一年，實(shí)驗(yàn)卡在這了，求知道的高手能夠幫我好心解答一下下~~~（金幣不多額，因?yàn)檫@是注冊3年來在蟲蟲上發(fā)的第一個帖） |
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2樓2014-08-25 16:11:27
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銅蟲 (初入文壇)
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3樓2014-08-25 21:01:22
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6樓2015-02-05 00:11:55
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