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北京石油化工學(xué)院2026年研究生招生接收調(diào)劑公告

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alman001

銅蟲(chóng) (小有名氣)

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蟲(chóng)號(hào): 1130961
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專(zhuān)業(yè): 作物種質(zhì)資源與遺傳育種學(xué)

[求助] 有關(guān)RACE的幾個(gè)問(wèn)題，大家來(lái)幫幫我��！已有2人參與

1. 3’ RACE相對(duì)好做一些，但是當(dāng)基因3' RACE的測(cè)序結(jié)果出來(lái)之后在NCBI的blast比對(duì)后有時(shí)候會(huì)發(fā)現(xiàn)和別的物種相同基因的3'會(huì)相差那么幾個(gè)堿基，同時(shí)用試劑盒做出來(lái)的自己基因的3'也是能找到Poly A尾巴的，那么這種情況下是繼續(xù)往3’端RACE直到和別的物種3'端比對(duì)得到頭還是怎么樣，怎樣確定一個(gè)基因RACE的3'端是不是已經(jīng)到頭了呢？（本人使用takara試劑盒）
2. 5’ RACE比較困難，我用takara的5'試劑盒，有時(shí)候我也會(huì)用takara的genome walking試劑盒在基因組水平上試圖找到基因的起始密碼子，但是兩種方法對(duì)我現(xiàn)在的基因效果都不太好，該怎么辦呢？如果我的基因用一個(gè)試劑盒反復(fù)設(shè)計(jì)引物總是5'擴(kuò)增不到頭，是什么原因，我該怎么辦呢？

大家快來(lái)幫幫我，總是這么耗著很郁悶的！

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有事做，無(wú)事?tīng)?zhēng)

1樓 2014-09-03 16:57:53

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我愛(ài)沈泉

金蟲(chóng) (小有名氣)

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【答案】應(yīng)助回帖

★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
lqf808: 金幣+1, 謝謝應(yīng)助 2014-09-07 06:25:24

3’ RACE 是比 5’ RACE 簡(jiǎn)單的多，我也有好多可以獲得3’ RACE但得不到5’ RACE的一些基因片段，5’ RACE的獲得不僅僅是和引物有關(guān)，也和原始的RNA模板及反轉(zhuǎn)錄有一定關(guān)系，所以慢慢來(lái)��！

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2樓2014-09-05 10:00:49

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alman001

銅蟲(chóng) (小有名氣)

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引用回帖:

2樓: Originally posted by 我愛(ài)沈泉 at 2014-09-05 10:00:49
3’ RACE 是比 5’ RACE 簡(jiǎn)單的多，我也有好多可以獲得3’ RACE但得不到5’ RACE的一些基因片段，5’ RACE的獲得不僅僅是和引物有關(guān)，也和原始的RNA模板及反轉(zhuǎn)錄有一定關(guān)系，所以慢慢來(lái)��！

好的，謝啦！

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有事做，無(wú)事?tīng)?zhēng)

3樓2014-09-06 14:17:43

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songrux

新蟲(chóng) (初入文壇)

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【答案】應(yīng)助回帖

有polyA尾巴是由于酶有加尾功能，不是由于你擴(kuò)到完整的序列，確定是否完整可在網(wǎng)上看一下ORF預(yù)測(cè)。

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4樓2015-03-28 10:42:25

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