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alman001銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
有關(guān)RACE的幾個(gè)問題,大家來幫幫我。 已有2人參與
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1. 3’ RACE相對好做一些,但是當(dāng)基因3' RACE的測序結(jié)果出來之后在NCBI的blast比對后有時(shí)候會發(fā)現(xiàn)和別的物種相同基因的3'會相差那么幾個(gè)堿基,同時(shí)用試劑盒做出來的自己基因的3'也是能找到Poly A尾巴的,那么這種情況下是繼續(xù)往3’端RACE直到和別的物種3'端比對得到頭還是怎么樣,怎樣確定一個(gè)基因RACE的3'端是不是已經(jīng)到頭了呢?(本人使用takara試劑盒) 2. 5’ RACE比較困難, 我用takara的5'試劑盒,有時(shí)候我也會用takara的genome walking試劑盒在基因組水平上試圖找到基因的起始密碼子,但是兩種方法對我現(xiàn)在的基因效果都不太好,該怎么辦呢?如果我的基因用一個(gè)試劑盒反復(fù)設(shè)計(jì)引物總是5'擴(kuò)增不到頭,是什么原因,我該怎么辦呢? 大家快來幫幫我,總是這么耗著很郁悶的! |

銅蟲 (小有名氣)

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