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流氓龜木蟲 (初入文壇)
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[求助]
HepG2細(xì)胞培養(yǎng)出現(xiàn)大面積意外死亡 已有2人參與
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請(qǐng)養(yǎng)細(xì)胞的高手給指導(dǎo)一下，情況如下：用含有10%血清和1%雙抗的DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的HepG2發(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)基變渾濁，HepG2細(xì)胞脫落，不知道是什么原因或是感染了哪種微生物，請(qǐng)大家給指導(dǎo)一下，謝謝。 P1010277.JPG P1010283.JPG |
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甘莫愁
木蟲 (初入文壇)
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2樓2015-02-10 15:08:32
董博士
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【答案】應(yīng)助回帖
| 雙抗?jié)舛冗^(guò)高，一般用1:1000或1:500就可以了，濃度過(guò)高對(duì)細(xì)胞有刺激作用；另外細(xì)胞液渾濁應(yīng)該是污染了，細(xì)胞培養(yǎng)的所有試劑必須嚴(yán)格無(wú)菌，建議設(shè)置一個(gè)陰性對(duì)照組（不加細(xì)胞），放到培養(yǎng)箱里，1~2天觀察空培養(yǎng)基是否污染，如果污染，建議將之前所有的培養(yǎng)試劑全部換掉，如果沒有污染，則應(yīng)該是操作過(guò)程有細(xì)菌污染，建議嚴(yán)格控制操作過(guò)程 |
3樓2015-02-13 18:25:22
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