 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 7 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1560 | 回復(fù): 6 | ||
steven689木蟲 (著名寫手)
|
[求助]
大神幫忙看看細(xì)胞是不是有污染 已有5人參與
|
|
最近培養(yǎng)Caco2和RAW 剛開始進(jìn)行復(fù)蘇，細(xì)胞狀態(tài)不是很好，這是第二天發(fā)現(xiàn)有許多黑色的小點，還有長條狀的，請大神給看看是不是有污染。第一張是Caco2 第二章是RAW 2014-10-11.jpg 2014-10-11.jpg |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
285化工學(xué)碩求調(diào)劑（081700）
已經(jīng)有10人回復(fù)
-
求材料調(diào)劑
已經(jīng)有10人回復(fù)
-
本科鄭州大學(xué)物理學(xué)院，一志愿華科070200學(xué)碩，346求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
國自科面上基金字體
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
能源材料化學(xué)課題組招收碩士研究生8-10名
已經(jīng)有11人回復(fù)
-
材料專碩英一數(shù)二306
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
085600材料與化工調(diào)劑 324分
已經(jīng)有9人回復(fù)
-
0703化學(xué)調(diào)劑
已經(jīng)有12人回復(fù)
-
0703化學(xué) 305求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
0703化學(xué)調(diào)劑，求各位老師收留
已經(jīng)有10人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 急，細(xì)胞表達(dá)情況不一致。求大神們解答一下。
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 請大神幫我看下細(xì)胞怎么了！
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 細(xì)胞污染，支原體 原蟲污染解決方法
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 如何在顯微鏡下觀察細(xì)胞污染？
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 細(xì)胞加藥后出現(xiàn)異常急求大神幫忙
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 細(xì)胞新手請問HEK-293細(xì)胞是不是被污染了？
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 人的cik細(xì)胞培養(yǎng)時 細(xì)胞液顏色變黃，經(jīng)檢查沒有污染，細(xì)胞生長不是很好，大部分死亡？
已經(jīng)有6人回復(fù)
- HEK-293細(xì)胞又被污染了，捉急啊，懇請求各路大俠們幫忙分析一下！
已經(jīng)有24人回復(fù)
- 細(xì)胞污染了，請大家?guī)兔﹁b定下是什么污染，如何處理
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 細(xì)胞染菌，求大神指點~
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 最新實驗室的細(xì)胞之間出現(xiàn)了好多小點污染，求有經(jīng)驗的大神給參謀下（有圖）
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 求大神告訴我我的A549細(xì)胞怎么長這個樣子？
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 揮大淚求助啊，細(xì)胞狀態(tài)越來越差還變少，什么原因啊（覺得不太像污染）
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 感受態(tài)細(xì)胞污染的問題
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 轉(zhuǎn)染后細(xì)胞污染
已經(jīng)有21人回復(fù)
- 細(xì)胞污染，小蝌蚪一樣的布朗運動生物污染
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 【求助/交流】細(xì)胞被支原體污染 有救嗎
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 【分享】細(xì)胞培養(yǎng)中常見的污染（含圖片）
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 【求助/交流】細(xì)胞培養(yǎng)時出現(xiàn)黑點點,污染 了嗎?
已經(jīng)有15人回復(fù)
陌路行客
金蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 17 (小學(xué)生)
- 金幣: 2138.6
- 紅花: 2
- 帖子: 113
- 在線: 34.7小時
- 蟲號: 615723
- 注冊: 2008-10-02
- 性別: GG
- 專業(yè): 生殖生物學(xué)
2樓2014-10-11 09:49:46
super_mm
金蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 15 (小學(xué)生)
- 金幣: 1701.8
- 紅花: 2
- 帖子: 105
- 在線: 19.3小時
- 蟲號: 3467080
- 注冊: 2014-10-11
- 性別: GG
- 專業(yè): 抗體工程學(xué)
3樓2014-10-11 10:19:39
【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
|
支原體污染Q&A 1、Q: 支原體污染對細(xì)胞有什么危害？ A: 支原體污染后，不會使細(xì)胞死亡可以與細(xì)胞長期共存，培養(yǎng)基一般不發(fā)生渾濁，細(xì) 胞無明顯變化，外觀上給人以正常感覺，實則細(xì)胞收到多方面潛在影響，如引起細(xì)胞變形， 影響 DNA 合成，抑制細(xì)胞生長等，以致影響實驗數(shù)據(jù)的可信度。 2、Q: 支原體污染有什么特征？ A: 細(xì)胞狀態(tài)變差,生長變慢，在顯微鏡下觀察可能會有小黑點，但培養(yǎng)基一般不發(fā)生 渾濁。細(xì)胞傳代以后就出現(xiàn)細(xì)胞間黑點，細(xì)胞空泡化，很多類似凋亡、壞死的細(xì)胞，最終細(xì) 胞漂浮，完全死亡。具體特征請見附件 2。 3、Q: 細(xì)胞培養(yǎng)時，顯微鏡下的小黑點是什么？ A: 支原體污染后，細(xì)胞凋亡壞死，釋放出大量碎片，看起來就像小黑蟲子。 4、Q: 細(xì)胞通過何種途徑感染支原體？ A: 支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染（某些支原體在人體是 正常菌群如口腔中的支原體）、培養(yǎng)基的污染、被污染細(xì)胞造成的交叉污染、實驗器材 的污染、制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染等等，由于支原體大小為 0.1~0.8 um，無細(xì) 胞壁，可透過一般過濾膜（0.22-0.45 um），血清中也可能含有支原體。 5、Q: 支原體污染如何檢測？ A: 利用支原體具特殊專一性之 primers，經(jīng)由 PCR 反應(yīng)來復(fù)制支原體 DNA。所用 primers 來自支原體的 conserved 16S-23S rRNA 序列，由于此段序列依支原體種類不同而不同， 因此可依所復(fù)制之 DNA 大小及其 restriction fragment 大小差異來作偵測與鑒定支原體。 （具體方法見附件）。 6、Q: 如何清除支原體？ A: 由于市場同類產(chǎn)品都為抗生素類，對細(xì)胞本身也會產(chǎn)生一定影響，而且有反復(fù)發(fā) 作的風(fēng)險，吉銳生物推出的 MycoplasmaOUT™ Treatment，活性成分為抗菌肽，經(jīng)多方測試表明對 大部分細(xì)胞無毒害作用，因其獨特的作用原理，支原體不會對其產(chǎn)生耐藥性，并且其作 用時間短，在三天內(nèi)就可殺滅支原體，并自動降解成氨基酸，不會對細(xì)胞造成二次污染。 7、Q: 為什么在培養(yǎng)細(xì)胞前要加入MycoplasmaOUT™ Prevention？ A：由于支原體污染后能夠進(jìn)入細(xì)胞，而MycoplasmaOUT™ Prevention不能夠進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)也就不能殺滅已經(jīng)進(jìn)入細(xì)胞的支原體，而這部分細(xì)胞死亡時會釋放其內(nèi)部的支原體，需要MycoplasmaOUT™ Prevention來殺滅新釋放出的支原體，以防止新生細(xì)胞受到污染。 8、Q: 所謂的黑膠蟲污染？ A:培養(yǎng)細(xì)胞發(fā)現(xiàn)小黑點現(xiàn)象很嚴(yán)重，原來對“黑膠蟲”一說嗤之以鼻，認(rèn)為那不過是自欺欺人的借口，覺得怎么也不會發(fā)生在自己身上。但是真的就碰上了：細(xì)胞傳代以后就出現(xiàn)細(xì)胞間黑點，細(xì)胞空泡化，很多類似凋亡、壞死的細(xì)胞，最終細(xì)胞漂浮，完全死亡。 上述現(xiàn)象很像所謂的“黑膠蟲”。 我感覺實際是支原體感染以后細(xì)胞生長不好造成的碎片和感染原蟲（現(xiàn)在看來是些胞外囊泡）的混合體。這種現(xiàn)象的直接原因是支原體等原蟲感染，間接表象是小黑點，被以訛傳訛成為了“黑膠蟲”。 光鏡下看不到支原體，但是可以看到支原體感染的終末現(xiàn)象——細(xì)胞凋亡壞死，釋放出大量碎片，看起來就像小黑蟲子。 查找類似的帖子——很多人是更換血清后出現(xiàn)這種問題； 說空氣傳播的可能是一個培養(yǎng)箱的人都用了同一種血清，而不是可以通過培養(yǎng)箱空氣傳播；感染最可能是牛源性的支原體，通過產(chǎn)道或血行感染。 所謂“細(xì)胞生長不受影響”，其實是污染的嚴(yán)重程度不高而已； 支原體污染嚴(yán)重就出現(xiàn)細(xì)胞大量空泡形成，細(xì)胞間空曠地帶出現(xiàn)大量黑點，細(xì)胞最終凋亡、壞死，漂起來。有些國產(chǎn)血清寫著建議滅活，其實是掛羊頭賣狗肉，那個56度30分鐘更多的是為了殺殺支原體的。實際上還有很多殺不死的。但可以降低產(chǎn)品支原體等微生物污染風(fēng)險。用阿奇霉素殺支原體，小黑點可以得到抑制，不過我想根治就很難了，而且處理時間很長，至少一個星期。 以上是自己個人總結(jié)的一點看法。建議不要總拿子虛烏有的“黑膠蟲”來說事。多考慮看不到的支原體，不要還停留在培根時代——只相信自己眼睛看見的。 |
4樓2014-10-11 10:54:44
【答案】應(yīng)助回帖
| 你看看跟你的細(xì)胞污染的是不是很像 |
5樓2014-10-11 10:56:02
星夢奇緣1990
金蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 2 (幼兒園)
- 金幣: 2095.6
- 散金: 70
- 紅花: 3
- 帖子: 403
- 在線: 172.2小時
- 蟲號: 1321180
- 注冊: 2011-06-12
- 性別: GG
- 專業(yè): 發(fā)育生物學(xué)與生殖生物學(xué)
6樓2014-10-12 23:54:21
7樓2014-10-28 10:37:27
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 steven689 的主題更新
| 7 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑，求各位老師收留 +10 | 秋有木北 2026-03-14 | 10/500 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 321求調(diào)劑 +3 | 何潤采123 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料與化工一志愿南昌大學(xué)327求調(diào)劑推薦 +8 | Ncdx123456 2026-03-13 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑 ，六級已過，有科研經(jīng)歷 +10 | 曦熙兮 2026-03-15 | 10/500 |
|
|
|
[考研]
 0854，計算機(jī)類招收調(diào)劑
+3
|
胡辣湯放糖 2026-03-15 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 301求調(diào)劑 +9 | yy要上岸呀 2026-03-17 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 278求調(diào)劑 +5 | 煙火先于春 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考博] 26博士申請 +3 | 1042136743 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料專碩326求調(diào)劑 +6 | 墨煜姒莘 2026-03-15 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 26考研求調(diào)劑 +6 | 丶宏Sir 2026-03-13 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +4 | ahbd 2026-03-14 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 中科院材料273求調(diào)劑 +4 | yzydy 2026-03-15 | 4/200 |
|
|
|
[考研]
機(jī)械專碩調(diào)劑
+3
|
笨笨兔子 2026-03-12 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 中科大材料與化工319求調(diào)劑 +3 | 孟鑫材料 2026-03-14 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 中科大材料專碩319求調(diào)劑 +3 | 孟鑫材料 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料與化工求調(diào)劑一志愿 985 總分 295 +8 | dream…… 2026-03-12 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +5 | 一定有學(xué)上- 2026-03-12 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 工科278分求調(diào)劑 +5 | 周慢熱啊 2026-03-12 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | 程雨杭 2026-03-12 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑（食品/專碩） +3 | xc321 2026-03-12 | 6/300 |
|