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[求助] Trizol同提取DNA做定量PCR 已有2人參與

各位大俠：我想用Trizol同時(shí)提取DNA和RNA，請(qǐng)教各位這樣提取的DNA可不可以做定量PCR？不勝感激！

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1樓 2014-10-13 11:56:24

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kx444555: 金幣+1, 鼓勵(lì)交流 2014-10-13 15:56:17

能提出來，降解不多就可以吧。我用TRIzol法中提DNA的方法沒提出來、、、、、、樓主不知道用TRIzol說明書里提DNA的方法提沒提過啊

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2樓2014-10-13 14:48:30

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cjl25413477

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kx444555: 金幣+2, 鼓勵(lì)交流 2014-10-13 15:56:20

拜托！你做的是什么基因的定量啊！不是要提RNA的么？提RNA的時(shí)候要較好的消除里面的DNA，因?yàn)閷?shí)驗(yàn)要牽扯到RNA反轉(zhuǎn)錄成DNA，為了保證基因拷貝數(shù)的準(zhǔn)確性，所得到的RNA不僅要完整，還要沒有DNA的污染，獲得的質(zhì)量較高的RNA做定量，沒有問題的！

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路漫漫兮，吾必上下而求索！

3樓2014-10-13 14:54:50

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3樓: Originally posted by cjl25413477 at 2014-10-13 14:54:50
拜托！你做的是什么基因的定量��！不是要提RNA的么？提RNA的時(shí)候要較好的消除里面的DNA，因?yàn)閷?shí)驗(yàn)要牽扯到RNA反轉(zhuǎn)錄成DNA，為了保證基因拷貝數(shù)的準(zhǔn)確性，所得到的RNA不僅要完整，還要沒有DNA的污染，獲得的質(zhì)量較高 ...

應(yīng)該是基因的表達(dá)量的準(zhǔn)確性！

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4樓2014-10-13 15:00:31

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4樓: Originally posted by cjl25413477 at 2014-10-13 15:00:31
應(yīng)該是基因的表達(dá)量的準(zhǔn)確性！...

DNA 也可以熒光定量的啊

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5樓2014-10-13 19:58:42

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2樓: Originally posted by fuchange918 at 2014-10-13 14:48:30
能提出來，降解不多就可以吧。我用TRIzol法中提DNA的方法沒提出來、、、、、、樓主不知道用TRIzol說明書里提DNA的方法提沒提過啊

弱堿稀釋的DNA，可以用么？

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6樓2014-10-13 20:18:00

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我想在做一個(gè)基因表達(dá)量的同時(shí)，要做另外一個(gè)基因的copy數(shù)，所以既需要提取DNA，也需要提取RNA.

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7樓2014-10-13 20:19:35

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5樓: Originally posted by fuchange918 at 2014-10-13 19:58:42
DNA 也可以熒光定量的啊...

它說明書上說必須用弱堿稀釋DNA，弱堿會(huì)影響PCR的擴(kuò)增效率么？

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8樓2014-10-13 20:20:59

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還沒有提取，先學(xué)習(xí)一下技術(shù)！

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9樓2014-10-13 20:24:10

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qiuzhileipo(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+1, 感謝分享經(jīng)驗(yàn) 2014-10-14 10:52:25

引用回帖:

6樓: Originally posted by qiuzhileipo at 2014-10-13 20:18:00
弱堿稀釋的DNA，可以用么？...

我用普通水溶解的，反正是沒有提出來，我看見最好是用弱堿溶解了，但是得用HEPES調(diào)節(jié)pH才能用于后續(xù)的PCR反應(yīng)。買這個(gè)藥品還得等一個(gè)多月的時(shí)間，我就舍棄這種方法了，改用CTAB了

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10樓2014-10-14 09:03:10

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