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一枝草銀蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
急求:自制的sephrose-4B親和層析柱純化抗體無(wú)法洗脫下來(lái)。!
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| 新手發(fā)帖期望,得到牛人幫助:最近使用溴化氰活化的sephrose-4B柱材制作親和柱,檢測(cè)自己的蛋白已經(jīng)偶聯(lián)到柱子上,偶聯(lián)率有90%左右,但現(xiàn)在有個(gè)問(wèn)題一直在困擾我,我將樣品(兔血清)上樣后,在特異性洗脫收集液中沒(méi)有檢測(cè)目的抗體(應(yīng)該是抗體吸附后未能洗脫下),所以想向有經(jīng)驗(yàn)的大牛請(qǐng)教:1 血清上樣后怎樣檢測(cè)目的蛋白是否被吸附 2選擇怎樣的洗脫液可以將目的蛋白洗脫下來(lái)(希望能給我提供些洗脫液種類(lèi))3怎樣檢測(cè)目的蛋白洗脫徹底。問(wèn)題有些多,期待您的回復(fù),謝謝。 |

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