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wccbb木蟲 (著名寫手)
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[求助]
內(nèi)標法加入量的問題 謝謝 已有1人參與
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各位大俠: 做組織分布實驗,采用內(nèi)標法計算?瞻最A實驗得到10ul(50ug/ml)【這個濃度差不多是標準曲線上面100%的點濃度】的藥物與10ul(10ug/ml)內(nèi)標經(jīng)過樣品處理后進樣的峰面積 二者相接近。我想請教一下,我認為內(nèi)標的加入量應該本著A藥/A內(nèi)=1,即藥物和內(nèi)標的響應值相接近,但是有的文獻介紹是二者濃度相接近為原則,不知道哪個正確?還有 藥物與內(nèi)標的峰面積比值,有沒有必須小于1的說法,還是大于1也可以?我預實驗的絕對回收率大概是60%多,是否可以,我看論文中都寫80%多,不知道怎么做的?最后一個問題:含有內(nèi)標的方法中,絕對回收率和相對回收率怎么計算?非常感謝! |
金蟲 (正式寫手)
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內(nèi)標的濃度沒有嚴格的要求。 做生物樣品分析的時候,一般習慣內(nèi)標峰面積控制在你標曲ULOQ化合物峰面積的50%左右,只要質(zhì)譜的響應比較穩(wěn)定即可。 樣品前處理后,一般絕對回收率要求在80%以上,認為方法較好。 但是只要控制你低中高濃度的回收率CV不是很大,你的方法也是可行的。 絕對回收率是用峰面積比值來算,對照組沒有提取過程,其他保持一致。 相對回收率是用ratio計算。 |

木蟲 (著名寫手)
金蟲 (正式寫手)

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